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如何提高細胞轉染效率2022/11/15
=細胞轉染是將外來核酸RNA或DNA等小分子物質轉移到健康細胞中以產生“轉基因細胞”的過程。在轉染過程中,外源核酸鏈進入健康細胞后,核酸與細胞中現有的DNA結合,形成一個轉基因細胞。細胞轉染過程中如何提高轉染效率,轉染效率的影響因素有哪些。細胞轉染的主要方法是什么?細胞轉染主要分為兩大類,即:穩定轉染和瞬時轉染。穩定轉染是將外源核酸繞過細胞膜,進入細胞,并通過核膜傳遞從而使外源核酸與宿主DNA(或RNA)整合以產生修飾基因。這種轉染方式所培育的細胞后代都將整合這種修飾基因,主要應用領域為:藥物篩
常見轉染試劑和對應的細胞系匯總2022/11/15
近年來,在細胞生物學領域新的研究與開發是轉染試劑的應用越來越普遍。轉染試劑的主要作用是輔助將miRNA、siRNA、蛋白質或質粒DNA等外源物質物輸送到細胞內部的一種試劑中。這些轉染反應的效率取決于多轉染試劑類型、所用轉染試劑的體積以及被轉染的細胞類型、細胞密度、培養基中的成分等因素。那么轉染試劑有哪些?下面就不同的細胞系作簡要說明和總結,以方便匹配選擇對應的轉染試劑。1.3LL細胞系轉染試劑:用于Lewis肺癌細胞的轉染試劑。該細胞主要用于研究人類肺癌的類型。2.A204細胞系轉染試劑:用于人
制藥廠消毒劑有哪些?2022/11/14
制藥廠消毒劑有哪些?消毒劑根據消毒方式大致分為兩類,即。物理方法和化學方法。物理方法熱滅菌:主要使用干熱和濕熱進行消毒作用。在濕熱滅菌中,巴氏殺菌主要用于溫度低于100°C的消毒。這種巴氏殺菌是一種旨在減少微生物并消除植物性細菌而不是某些食品和飲料中的細菌孢子的過程。牛奶的巴氏殺菌首先在約63°C的溫度下進行30分鐘或加熱到更高的溫度,72°C,并保持15秒進行消毒。過濾:這種方法適用于對熱不穩定的流體,如抗生素、維生素和其他生長因子,具有非常細的孔徑小于0.45微米的膜過濾器。這些液體在使用前
細胞培養前景怎么樣?2022/11/12
在制藥行業,細胞培養已成為抗體生產的重要組成部分。細胞培養技術已被用于生產輪狀病毒、脊髓灰質炎、天花、肝炎、風疹和水痘等相關抗體。基于細胞的流感抗體也已獲準在美國和許多歐洲國家使用。那么細胞培養前景怎么樣?細胞培養的市場機遇:對3D細胞培養的需求不斷增長3D細胞培養由于多種原因,對2D細胞培養的需求正在增加。2D細胞培養方法包括在平面上將細胞培養為2D單層。二維貼壁細胞培養從根本上限制了細胞的產量。科研人員提出了3D細胞培養來解決這些問題。這些培養物已被證明在一些基本生物學機制的研究中是有效的,
天根基因組提取相關產品選擇指南2022/11/11
天根核酸提取與純化試劑盒從各種不同來源樣品,如細菌、酵母、血液,動物組織、動物細胞、植物組織和植物組胞、飼料、醫療樣本和深加工食品中提取高純度的基因組DNA。可得到MAX為50kb基因組片段。大部分片段大小在20-30kb。用戶可根據需要選用不同的抽提試劑盒來進行不同樣品DNA的抽提。1.快速DNA提取檢測試劑盒(KG203)植物葉片,種子,動物組織、血液、酵母、細菌2.血液直接PCR試劑盒(KG204)動物、植物、細菌3.快速DNA提取擴增套裝(KG201)植物DNA提取試劑盒主要有以下幾種:
動物細胞培養需要的實驗室設備和耗材清單2022/11/11
用于動物細胞培養的實驗室設備和耗材有很多種,進行動物細胞培養所需的基本設備如下:設備有益設備有用的附加設備振蕩培養箱生物安全柜低溫冷凍柜顯微鏡細胞計數儀玻璃器皿清洗機滅菌器真空泵菌落柜臺清洗儀器二氧化碳培養箱共聚焦顯微鏡殺菌干燥箱制備和質量控制熒光激活細胞分選儀離心機溫度記錄純水機細胞生物反應器液氮罐移液器和自動移液器水浴鍋動物細胞培養實驗室所需基本設備清單:無菌工作區/細胞培養罩(即層流罩或生物安全柜)培養箱(推薦使用潮濕的二氧化碳培養箱)水浴離心機冰箱和冰柜(–20°C)細胞計數器(例如自動
蛋白質印跡技術(Western Blot)的基本流程和步驟2022/11/11
蛋白質印跡技術(WesternBlot)的基本流程和步驟本文摘要蛋白質印跡技術(免疫印跡實驗)又稱為WesternBlot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。WesternBlot主要用于檢測或分析蛋白,應用領域集中在基因表達研究、抗體活性檢測和疾病診斷等。01蛋白質印跡基本流程圖02westernblot步驟樣品準備:Tanon連續梯度預制膠(4-20%10孔/15孔/17孔);(4-12%10孔/15孔/17孔)TanonMops/MES電泳緩沖液(粉劑)Tanon預
胎牛血清的選購小技巧及檢驗標準2022/11/11
胎牛血清的選購小技巧及檢驗標準胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結血液的液體部分,不含細胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對細胞生長至關重要的營養和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養細胞的維持和生長至關重要。FBS還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質和激素。FBS應用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細胞培養中,其濃度高達20%甚至更高,它提供許多促進細胞存活和增殖的必需營養素和生長因子。然而,需要注意的是,人類細胞培養物中的FBS可能會引入研究成果。用人類血清
細胞培養市場的主要分類、面臨的挑戰及前景分析2022/11/11
細胞培養市場的主要分類、面臨的挑戰及前景分析在制藥行業,細胞培養已成為抗體生產的重要組成部分。細胞培養技術已被用于生產輪狀病毒、脊髓灰質炎、天花、肝炎、風疹和水痘等相關抗體。基于細胞的流感抗體也已獲準在美國和許多歐洲國家使用。那么細胞培養前景怎么樣?細胞培養的市場機遇:對3D細胞培養的需求不斷增長3D細胞培養由于多種原因,對2D細胞培養的需求正在增加。2D細胞培養方法包括在平面上將細胞培養為2D單層。二維貼壁細胞培養從根本上限制了細胞的產量。科研人員提出了3D細胞培養來解決這些問題。這些培養物已
基因重組技術在基因組學研究中的應用和前景2022/11/10
基因重組技術在分子診斷和基因組學研究中的應用和前景基因重組技術的應用和前景如何?根據科學新報數據統計,預計到2028年,生物技術中基因重組技術國際市場規模預計將達到308億美元。市場預計將以從2021年到2028年,年增長率為2.0%。推動市場的主要因素是分子診斷和基因組學研究的擴大、新型和先進產品的推出以及個性化醫療的日益普及。從技術層面上分析,基于PCR的擴增部分在2020年占的收入比例偏高,這主要是因為PCR技術在各種應用中的廣泛使用。同時,與之配套PCR檢測試劑盒及相關的PCR耗材需求也
2022年10月藥企高管動態2022/11/10
默沙東CEO戴福財出任董事長。默沙東宣布董事會一致選舉戴福財(RobertM.Davis)擔任董事會主席(董事長),自12月1日起生效。前任董事長福維澤(KennethC.Frazier)計劃于2022年11月30日退休。自1992年加入默沙東,福維澤已為該公司服務30年。2021年,福維澤已于7月1日離開默沙東CEO執行官一職,由該公司前CEO財務官戴福財接替這一崗位。GSK葛蘭素史克(GSK)疫苗負責人羅杰將離職,尋求公司以外的新職務。2013年到2018年,他負責管理GSK全球制藥和消費者
Wetern Blot蛋白印跡實驗方法及步驟2022/11/10
WeternBlot蛋白印跡實驗方法及步驟蛋白免疫印跡法是蛋白質學中常用的檢測方法,WeternBlot-蛋白印跡實驗步驟主要是通過SDS凝膠分離、轉印到膜上并進行信號檢測的方法。具體實驗方法如下:一、試劑和緩沖液l1xRIPA緩沖液:50mMTris、150mMNaCl、0.1%SDS、0.5%脫氧膽酸鈉、1%TritonX-100或NP40。l1xPBS緩沖液:137mMNaCl、2.7mMKCl、2.7mMNa2HPO4、2.7mMKH2PO4、pH7.4lBCA蛋白檢測試劑盒或Bradf
微管蛋白的功能、類型及在癌癥中的應用2022/11/10
微管蛋白的功能、類型及在癌癥中的應用什么是微管蛋白?微管蛋白是構成真核細胞骨架的重要部分,而且廣泛存在于活細胞的微管中。微管是組成真核細胞骨架的基本元素。主要有蛋白α和β聚合而成。微管在細胞支持和細胞運動中起著至關重要的作用,使微管蛋白對正常細胞功能至關重要。微管通過聚合成微管的α-和β-微管蛋白為真核細胞提供結構支持、細胞內支持和DNA分離。這些結構由球狀蛋白微管蛋白的剛性空心纖維軸形成,直徑約為25nm。α-和β微管蛋白由相關基因的小家族編碼,并結合形成構建微管的二聚體。與肌動蛋白一起,微管
流式細胞術(FCM)的優勢及應用2022/11/09
流式細胞術(FCM)是一種基于激光的技術,用于生物顆粒的多參數分析。隨著技術的發展,FCM已進入許多使用領域。FCM也用于免疫表型研究。因此,它可以用于確定細胞亞群、譜系、細胞分化和激活階段以及克隆性。隨著FCM分析的發展,B細胞發育和分化的各個階段已變得可識別。此外,FCM已經開始識別和表征幾個不同B細胞亞群和相關診所中的表達譜。流式細胞術分析血小板功能有較多優勢。它可以血小板直接在全血的生理環境中進行分析(包括紅細胞和白細胞,兩者都影響血小板活化)。樣本的簡化操作可防止人為的體外活化和血小板
使用細胞轉染構建穩定細胞系的方法2022/11/09
使用細胞轉染構建穩定細胞系的方法細胞系的穩定對于其廣泛應用具有重要作用。經過細胞轉染后的穩定細胞系適用于重組蛋白的生產、基因功能研究以及藥物發現分析。目的基因在細胞系中穩定表達,克服了瞬時表達轉染效率低的問題,產生更多的目的蛋白。實現細胞系的穩定主要有兩種途徑:一種是通過真核載體實現,該載體在轉染細胞的細胞核中含有用于附加體維持的元件。另一種是通過將轉染的質粒直接整合到靶細胞基因組中來實現。由于附加型的穩定性比較有限,附加型質粒元件通常僅限于某些物種,因此通常使用整合到宿主細胞染色體中。這種方法
有沒有什么辦法可以降低超純水機耗材的消耗速度?2022/11/09
超純水儀是實驗室常用的基礎實驗室設備之一,它的主要作用是為實驗室提供純水、超純水等符合實驗室標準的特殊用水需求。純水機的耗材需要定期更換,所以每年實驗室經費開支中純水設備耗材也占有不少的比例,為什么總感覺這些實驗室耗材的消費速度很快?有沒有什么辦法可以降低超純水機耗材的消耗速度呢?一、節約用水,即取即用。當水處于非流動狀態時,比較容易滋生微生物。尤其是實驗室超純水由于對水的要求標準比較高,過久儲存很容易受到外界環境中的微塵、空氣中的CO2等發生反應,造成PH值下降。如果提前取水往往取水的時候水質
超純水機配件和純水設備耗材主要有哪些2022/11/09
超純水機和純水機在實驗室中廣泛使用,一臺純水機價格從幾千元到數十萬元不等。其實純水機的結構并不是很復雜,所以機器本身的故障率發生率并不高。值的注意的是超純水機配件以及純水設備耗材都屬于易耗品,需要經常定期更換,這些維護成本才是純水機耗錢的主要原因。那么純水機的配件都有哪些呢?下面小編就列一下純水機和超純水機設備上常用的配件及耗材。一、超純水設備中的耗材超純水設備耗材中更換頻率較高的耗材主要有:預處理柱(預純化柱)、純化柱(反滲透柱),超純化柱三種,超純水機其他配件包括水箱空氣過濾器、PES終端過
HPLC分析實驗選擇哪種實驗室純水機?2022/11/09
HPLC分析法也就是高效液相色譜分析法,這種實驗方法更主要用來分離、分析高沸點、熱穩定較差及相對分子量比較大的物質。主要應用領域為核酸類、肽類、內酯類、稠環芳烴類、高聚物類、藥物、人體代謝產物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑等物質分析。在HPLC分析實驗中,HPLC分析柱以及分析試劑對實驗的結果都有著較大的影響。尤其是實驗室純水的指標,是影響HPLC分析實驗的關鍵因素。那么經常做這種實驗的實驗室選擇哪種實驗室純水機比較合適呢?一、實驗室純水中的污染物會對HPLC分析實驗產生哪些影響?1.有機物:實
細胞轉染方法有哪些2022/11/09
細胞轉染方法有哪些細胞轉染技術是一種常見的實驗室細胞培養技術,主要應用于生命科學研究領域、藥物研發、新藥開發等領域。細胞轉染技術可以分為體外轉染和體內轉染兩種技術。體外轉染是指將遺傳物質(例如核酸-DNA或RNA)遞送到培養的細胞(通常是癌細胞系)中。體內轉染是指將小分子基因片段(如治療性siRNA、質粒DNA、小蛋白等)遞送至靶組織。細胞轉染可以使用自行使用轉染試劑盒進行細胞轉染操作,或者由生物CRO所提供的可以獲得GLP認證的細胞轉染服務。當前的細胞轉染方法主要有物理方法和化學方法兩種:這些
消毒劑的分類和應用2022/10/21
消毒劑的分類和應用制藥廠消毒劑有哪些?消毒劑根據消毒方式大致分為兩類,即。物理方法和化學方法。物理方法熱滅菌:主要使用干熱和濕熱進行消毒作用。在濕熱滅菌中,巴氏殺菌主要用于溫度低于100°C的消毒。這種巴氏殺菌是一種旨在減少微生物并消除植物性細菌而不是某些食品和飲料中的細菌孢子的過程。牛奶的巴氏殺菌首先在約63°C的溫度下進行30分鐘或加熱到更高的溫度,72°C,并保持15秒進行消毒。過濾:這種方法適用于對熱不穩定的流體,如抗生素、維生素和其他生長因子,具有非常細的孔徑小于0.45微米的膜過濾器
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