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流式細胞技術的應用2022/12/09

流式細胞術（FCM）是一種基于激光的技術，用于生物顆粒的多參數分析。隨著技術的發展，FCM已進入許多使用領域。FCM也用于免疫表型研究。因此，它可以用于確定細胞亞群、譜系、細胞分化和激活階段以及克隆性。隨著FCM分析的發展，B細胞發育和分化的各個階段已變得可識別。此外，FCM已經開始識別和表征幾個不同B細胞亞群和相關診所中的表達譜。流式細胞術分析血小板功能有較多優勢。它可以血小板直接在全血的生理環境中進行分析（包括紅細胞和白細胞，兩者都影響血小板活化）。樣本的簡化操作可防止人為的體外活化和血小板

使用流式細胞儀檢測血小板的注意事項2022/12/09

通過使用使用流式細胞儀可以對血小板進行信號傳遞、細胞骨架架構、糖蛋白結構、血小板活化反應，糖蛋白缺陷檢測，RNA含量，血小板抗體等分析檢測。使用流式細胞儀進行血小板分析檢測時需要注意以下幾點：一)抗體的選擇選擇CDWorkshop中的單克隆抗體.單克隆抗體反應特異性高,非特異性結合少,但由于血小板富含FcRⅡ(CD32,FeⅡ受體),而Fc受體對不同抗體亞類具有不同親和力,所以在業類選擇上,對于人的抗體以選擇IgG1為好.二)抗凝劑的選擇盡量避免使用肝素;EDTA在室溫20~25℃時其抗凝效果與

細胞劃痕實驗步驟2022/12/08

細胞劃痕實驗是指將細胞培養在培養皿或平板上，待細胞融合后用槍頭或其他硬物在中央區域畫一條線，這條線內的細胞被機械力去除掉了，然后將細胞繼續培養，觀察細胞向無細胞的劃痕區域遷移的情況，來判斷細胞的遷移能力。其意義在于：價格低廉，操作簡單，還有很重要的一點在于細胞外圍環境簡單、單純，容易控制，是腫瘤細胞基本的研究方法。一、實驗前準備實驗開始前，將離心管、吸管筒、移液槍、槍頭，直尺等放入無菌超凈工作臺，以紫外線照射30min。然后，采用通風機通風3min。取出無菌6孔板，用黑色記號筆在6孔板底部，用直

移液槍壞了怎么維修2022/12/08

移液槍是實驗室里的常用工具，無論是分子生物學、蛋白組化免疫、細胞生物學、檢驗機構，科研所都經常用到。移液器的準確度很重要，稍有偏差就會對實驗造成影響，甚至實驗失敗。所以建議移液器的保養周期為1年，若長時間不保養不僅會影響移液器的準確度，還會出現移液卡頓，漏液、殘液等更多的問題，不當的操作方法也會對移液器造成不同程度的損壞。移液槍壞了怎么維修，下面小編歸納一下移液過程中的常見的問題及解決方案，以供參考。一、移液器吸液嘴內有殘液，排液不盡：出現這種情況主要是因為移液槍槍頭不匹配，建議使用換移液器原配

移液槍壞了怎么辦？你還在為移液器校準苦惱嗎2022/12/08

最近和很多移液器用戶聊移液器校準的話題時，很多移液的操作人員居然也是抱著“佛系心態”。當被問及：你們移液器會定期送給專業的機構做校準嗎，佛系用戶們的回答大致是這樣幾類：1.移液器校準啊，好啊，那你們能上門來幫我們校一下嗎？2.定期校準啊？不清楚哎，我們一般移液器出問題都找采購的。3.是免費的嗎？哦，收費的啊，那我們自己測測吧。對于移液器校準，小編需要嚴肅地和用戶們探討幾個知識點。一、移液器的校準能否上門進行？移液器的校準，需要在規定的條件下（一般是溫濕度和環境氣流的控制）、在滿足稱量要求的天平上

GMP車間環境潔凈要求2022/12/06

藥品生產企業必須有整潔的生產環境，有一定的綠化面積；廠區的地面要全部硬化，路面及運輸等不應對藥品的生產造成污染；生產、行政、生活和輔助區的總體布局應合理，相互分開，不得互相妨礙。GMP對藥品生產環境和潔凈室的潔凈要求有哪些呢？一、潔凈區表面應符合哪些要求？潔凈室（區）的內表面應平整光滑、無裂縫、接口嚴密、無顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒，墻壁與場面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少積聚和便于清潔。潔凈區的光照度應不低于300勒克斯；對照度有特殊要求的生產部位可設置局部照明。二、藥品生產潔凈室

GMP制藥企業的衛生標準要求是什么2022/12/06

一、制藥廠區環境的衛生要求：GMP制藥企業廠區環境清潔整齊，無雜草和積水、無蚊蠅孳生地，空氣質量符合國家規定的大氣標準；⑵生產區、生活區、輔助區分開，人流物流分開；⑶廠區內無廢物和垃圾，廠區外的垃圾站必須遠離生產區，有隔離消毒措施，并及時清運，不對廠區環境造成污染；⑷廠區內的衛生設施要清潔、通暢，無堵塞物及排泄物，由專人及時清掃、消毒；⑸廠區內車輛及其他物品須放在規定區域，不得在其他地方任意堆放。二、普通生產區的衛生要求⑴門窗、玻璃、墻面、頂棚應清潔，無灰塵，地面應平整，無積水、雜物。建筑結構設

關于FDA機構實驗耗材短缺事件解答2022/12/06

美國食品和藥物管理局(FDA)意識到，由于公共衛生緊急事件期間需求增加以及最近的供應商供應挑戰，美國的血液樣本采集（抽血）管供應正經歷重大中斷。2022年1月19日，FDA更新了設備短缺清單，包括所有血液樣本采集管（產品代碼GIM和JKA）。此前，2021年6月10日，FDA僅將檸檬酸鈉（淺藍色頂部）管添加到設備短缺清單中。FDA建議醫療保健提供者、實驗室主任、抽血醫生和其他人員考慮采樣管保存策略，以盡量減少采樣管的使用，并為那些在醫學上需要檢測的患者提供優質和安全的患者護理。問：所有采樣管都缺

如何做移液器的CNAS 認證2022/12/02

移液器作為轉移液體的計量工具并非強檢產品。但因通常應用于精準的液體轉移，對性能要求很嚴格，用戶往往需要檢定或校準。移液器的檢定工作一般由計量院執行，出具合格或不合格的定性結論；校準則可以由企業內部或外部校準實驗室完成，出具校準報告。校準報告不直接體現合格或不合格，可間接通過校準依據的法規進行參數比對，從而間接確認是性能否符合要求。CNAS認證是通過CNAS認可并能對外證明儀器設備的準確度。目前校準的檢定規程有三種：企業標準、國標（JJG-646）和國際標準（ISO8655-2）。不同規程在具體準

PCR實驗中DNA回收實驗步驟2022/12/02

【實驗原理】1.DNA片段回收方法：DNA片段在適當濃度的瓊脂糖凝膠中，通上一定電壓進行電泳，不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DNA片段的凝膠，用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片段回收純化。2.利用Taq酶能夠在PCR產物的3’末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以把PCR產物插入到質粒載體的多克隆位點，可用于PCR產物的克隆和測序。商品化的T載體有很多。本實驗采用TaKaRa公司的pMDTM18-TSim

全自動細胞計數儀-細胞計數方法2022/12/01

細胞計數是確定培養中鋪板的細胞濃度、確定細胞活力和評估細胞分離程序結果的一個組成部分。建議在細胞分離之前進行初始細胞計數；然后可以將該數字與細胞分離后的細胞計數進行比較，以計算細胞恢復率。此外，當預期細胞活力可能會降低時，應進行活細胞計數，例如，在處理冷凍保存的細胞或離體操作的細胞時。本文描述了如何使用3%乙酸和亞-CH3藍進行總有核細胞計數，以及如何通過臺盼藍染料排除進行活細胞計數。實驗步驟和方法：I部分：樣品制備選項1：用3%乙酸和亞-CH3藍對總有核細胞計數進行細胞稀釋使用磷酸鹽緩沖鹽水或

SDS堿裂解法制備質粒DNA簡介2022/12/01

近些年來，隨著PCR技術的出現，以及DNA克隆和測序方法的發展，對大量質粒載體和重組子的需求也大大減少。在本方案中，通過堿裂解法的放大（BirnboimａndDoly1979）,質粒DNA可從清亮的細菌裂解物中通過含有漠化乙錠的CsCl梯度離心來進行純化。無論是高拷貝數的質粒還是低拷貝數的質粒，通過這種方法可以得到每毫升3?5^g的DNA。重組子的質粒一般產量較少，這取決于克隆的DNA片段的大小和特點。材料為正確使用本方案中的器材和危險試劑，必須查閱相應的材料安全數據表并咨詢所在機構的環境衛生和

高效消毒劑有哪些2022/11/25

潔凈室和潔凈區必須定期清潔和消毒。這通常使用清潔劑步驟進行，然后使用消毒劑。可能需要用水去除消毒劑的殘留物。清潔和消毒也應延伸到設備。此外，對于人員，消毒對于制藥企業來說很重要。那么高效消毒劑有哪些？本文介紹了在制藥設施中實際應用清潔和驗證程序時要考慮的關鍵點，重點是消毒劑的選擇。洗滌劑對于潔凈室，需要使用清潔劑去除“污垢”（蛋白質、油脂等）。洗滌劑滲透污垢并降低表面張力（將土壤固定在表面）以使其去除。為了使消毒劑有效工作，這是必要的。此外，懸浮中的微生物很容易通過沖洗去除或用消毒劑殺死。對于這

潔凈室消毒方法和使用消毒劑的注意事項2022/11/25

潔凈室是實驗室中重要的區域，潔凈室的消毒措施也是重要的，那么潔凈室消毒的注意事項有哪些？一、消毒制度的制定潔凈室清潔和消毒涉及許多重要步驟，所以需要制定嚴格的消毒標準、消毒方法等。二、清潔、打掃在制藥業中，清潔是指從表面去除殘留物和污垢的過程，以達到表面清潔的效果。在進行清潔的過程中一般會使用清潔劑，因為清潔劑可以通過滲透污垢和降低表面張力（將污垢固定在表面）來去除污垢。對于潔凈室，在使用消毒劑之前同樣需要有清潔的步驟。也就是在使用消毒劑之前，清潔設備表面等，從而保證良好的消毒效果。三、消毒劑的

潔凈室消毒劑-消毒效果驗證方法2022/11/24

潔凈室消毒劑-消毒效果驗證方法潔凈室消毒常常會用到多種不同類型的消毒劑，消毒力的效果驗證，以及驗證清潔和消毒程序的有效性，成為衡量消毒劑的重要指標。關于潔凈室消毒劑效果驗證方法主要可以分為四個階段來進行，每個階段都可以根據法規要求獨立執行。階段1：內源性微生物污染的表征：識別被認為是關鍵和最能代表消毒劑使用環境的內源性微生物菌株，這有助于確定將進行功效測試的微生物。階段2：實際使用條件下消毒效果的實驗評價：使用定量載體測試（參考方法：EN13697:2001）和代表待處理表面（例如玻璃、不銹鋼、

季銨鹽消毒劑的優缺點是什么2022/11/24

季銨鹽化合物（QACs）是一種廣泛使用的陽離子表面活性劑。它們是由銨基的氫原子被烷烴或芳烴基團取代而形成的。通式為(R4N+)X-，其中R為烴基或苯基，X-為鹵素離子如Cl-、Br-等。QACs的性質由其取代的R基團的結構和性質決定，可分為四類，即烷基三CHO-銨化合物（ATMACs）和二烷基二CHO-銨化合物（DADMACs）、芐基烷基二CHO-銨化合物（BACs）和雜環銨化合物（HACs））。那么季銨鹽消毒劑的優缺點是什么？一般來說，在季銨鹽消毒劑中QACs中取代R基團的碳鏈越長，其水溶性越

季銨鹽消毒劑的優缺點2022/11/24

季銨鹽化合物（QACs）是一種廣泛使用的陽離子表面活性劑。它們是由銨基的氫原子被烷烴或芳烴基團取代而形成的。通式為(R4N+)X-，其中R為烴基或苯基，X-為鹵素離子如Cl-、Br-等。QACs的性質由其取代的R基團的結構和性質決定，可分為四類，即烷基三CHO-銨化合物（ATMACs）和二烷基二CHO-銨化合物（DADMACs）、芐基烷基二CHO-銨化合物（BACs）和雜環銨化合物（HACs））。那么季銨鹽消毒劑的優缺點是什么？一般來說，在季銨鹽消毒劑中QACs中取代R基團的碳鏈越長，其水溶性越

PCR產物的克隆-DNA回收實驗步驟2022/11/24

PCR產物的克隆-DNA回收實驗步驟【實驗原理】1.DNA片段回收方法：DNA片段在適當濃度的瓊脂糖凝膠中，通上一定電壓進行電泳，不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DNA片段的凝膠，用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片段回收純化。2.利用Taq酶能夠在PCR產物的3’末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以把PCR產物插入到質粒載體的多克隆位點，可用于PCR產物的克隆和測序。商品化的T載體有很多。本實驗采用TaK

選擇生物消毒劑需要考慮哪些因素呢2022/11/24

消毒是將存在的微生物數量減少到不存在風險的水平的過程。消毒不同于滅菌，其中物體不含所有活的微生物。那么選擇生物消毒劑需要考慮哪些因素呢？生物消毒劑通常不會殺死它們接觸的所有微生物，也不能同樣好地消毒所有微生物，例如大多數不會殺死細菌孢子。選擇的消毒劑類型取決于微生物、應用方法和待消毒材料的性質。生物消毒劑應用于非生命物體和材料，例如表面和儀器以控制和預防感染，而防腐劑（一種消毒劑）應用于活體組織。選擇和使用生物消毒劑時需要考慮以下因素：1.功效：消毒劑必須對目標微生物起作用。可以使用制造商的文獻

實時熒光pcr檢測DNA濃度常用的生物試劑2022/11/23

實時熒光pcr檢測利用熒光分析法用特定結合DNA的染料來測定DNA的濃度。常用的DNA染料包括溴化乙錠、Hoechst33258、SYBRGreenI和II、SYBRGold及PicoGreen。溴化乙錠溴化乙錠含有三環菲嚏平面環系統，可嵌入到雙鏈DNA堿基之間。嵌入DNA雙螺旋后，溴化乙錠的菲嚏環平面位于與螺旋軸相垂直的位置，并通過范德瓦耳斯力與上下堿基結合。而其平面環系統被埋在底部，其外側的苯基和乙烷基處于DNA雙螺旋的大溝內。在高強度離子溶液的飽和狀態，大約每2.5個堿基對嵌入一分子的溴化