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如何利用生物反應(yīng)器實現(xiàn)干細(xì)胞體外擴(kuò)增培養(yǎng)2022/08/02

干細(xì)胞是指具有無限分裂增長能力，可以進(jìn)行自我更新，并能在不同誘導(dǎo)條件下，分化成不同類型的細(xì)胞的一種特殊生物細(xì)胞。比如我們常見的骨髓干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞，廣泛應(yīng)用于免疫系統(tǒng)疾病治療，內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病治療等。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中利用生物反應(yīng)器進(jìn)行干細(xì)胞的體外培養(yǎng)，使干細(xì)胞大量增殖量產(chǎn)，已成為3D干細(xì)胞擴(kuò)培的主流手段。一、干細(xì)胞的培養(yǎng)方法干細(xì)胞的培養(yǎng)方法主要有兩種，一種是2D培養(yǎng)，另一種是3D立體培養(yǎng)。2D培養(yǎng)多采用貼壁培養(yǎng)技術(shù)，在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿等容器中加入細(xì)胞生長所必須的營養(yǎng)物質(zhì)，在特定的培養(yǎng)環(huán)境下，細(xì)胞貼附于

pcr耗材會直接影響pcr檢測實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性嗎？2022/08/02

直接影響到pcr檢測實驗結(jié)果的因素，通常有以下幾種：引物與模板DNA互補的程度、酶的濃度、鎂離子濃度、dNTP的質(zhì)量與濃度。還有循環(huán)次數(shù)、溫度和時間的設(shè)置，pcr實驗設(shè)備與配套耗材等在眾多影響因素中，pcr實驗耗材也是影響pcr檢測實驗結(jié)果的重要因素。用于pcr檢測的耗材類型包括：8連管、pcr管、無裙邊、半裙邊，全裙邊，深孔板孔等。這么多的耗材該如何選擇呢？pcr耗材多數(shù)屬于PP材質(zhì)，由于這種材質(zhì)不僅有良好的化學(xué)耐性而且表面不易粘附生物分子，可耐120°C的高溫。我們常見的pcr耗材規(guī)格及體積

如何分析定量PCR實驗中的Ct值與Cq 值?2022/08/01

如何分析定量PCR實驗中的Ct值與Cq值？在進(jìn)行定量PCR實驗時，實驗數(shù)據(jù)中的Ct值是至關(guān)重要的。今天將帶您了解Ct值在qPCR中的關(guān)鍵作用、及其計算方式和分析統(tǒng)計方法。Ct值多重名稱在我們深入解釋什么是Ct值之前，我們想花點時間強調(diào)一下，多年來該值已被賦予多個名稱，包括：Ct–閾值循環(huán)Cp–交叉點TOP——起飛點Cq–量化周期這些值都是一樣的，只是名稱不同。為了規(guī)范qPCR的命名法，一般標(biāo)準(zhǔn)實驗中會使用Cq值。什么是Cq值？定量PCR實驗通常用于量化目標(biāo)序列的絕對量或比較樣本之間目標(biāo)序列的相對

凝膠成像儀的應(yīng)用2022/07/29

凝膠成像是指對基因片段或蛋白等進(jìn)行凝膠電泳實驗并通過其成像的圖像進(jìn)行系統(tǒng)分析的一種測定方法。不同類型的凝膠成像，它的應(yīng)用范圍也不一樣。用于實驗的凝膠成像主要應(yīng)用在以下幾種類型的實驗：1.分子生物學(xué)中分子量的估算：通過凝膠成像系統(tǒng)的電泳實驗分析可直接估算蛋白或DNA/RNA分子量的大小。2.分子密度的掃描與定量：通過凝膠成像系統(tǒng)與染色實驗相結(jié)合的方法可以輕松進(jìn)行分子密度的掃描和定量分析。3.PCR定量：PCR定量是分子生物學(xué)中常常遇到的，通過凝膠成像分析系統(tǒng)可以快速地進(jìn)行PCR定量分析。我們常見的

凝膠成像儀的作用2022/07/29

凝膠成像儀相信大家都不陌生，它在生物實驗中都扮演著什么角色呢？今天我們就來了解一下：1、采集實驗過程中的圖像凝膠成像儀的主要作用使通過自帶的CCD設(shè)備拍攝圖像并傳輸在電腦中。工作原理如下：在暗箱中的紫外燈照射下，通過紫外燈的光源，在暗箱中自動完成對焦成像并優(yōu)化所獲取的圖像信息存儲在設(shè)備中，實驗者可以在圖像中添加注釋貨相關(guān)信息，編輯完成后，即可打印或傳輸。2、DNA或蛋白分子定量通過凝膠電泳實驗獲得不同的DNA或蛋白條帶影像，再利用凝膠成像儀上的圖象處理軟件中相關(guān)功能自動比對Marker標(biāo)準(zhǔn)條值，

利用微生物發(fā)酵罐生產(chǎn)雙歧桿菌工藝技術(shù)2022/07/27

標(biāo)簽：雙歧桿菌發(fā)酵罐微生物微生物發(fā)酵罐雙歧桿菌是一種益生菌，可有效增加腸道內(nèi)有益菌群，對于維持腸道的微生態(tài)平衡有著十分重要的作用，市場上的雙歧桿菌主要是利用微生物發(fā)酵罐經(jīng)過菌液培養(yǎng)、比例調(diào)配、接種發(fā)酵，凍干等生產(chǎn)工藝所制成的片劑、干粉或膠囊制劑。一、雙歧桿菌的作用雙歧桿菌對于人體健康起著重要的作用，據(jù)統(tǒng)計嬰兒哺乳期腸道內(nèi)的雙歧桿菌數(shù)量可以達(dá)到菌群數(shù)量的90%左右，而隨著年齡的增長該菌群數(shù)量開始逐漸減少，65歲以上的老人，雙歧桿菌數(shù)量甚至降低至7%左右。另外，雙歧桿菌還具有減低內(nèi)毒素，護(hù)肝、抗腫瘤

傳感器在生物反應(yīng)器上的應(yīng)用2022/07/27

傳感器是生物反應(yīng)器至關(guān)重要的部件之一，在生物反應(yīng)器中，傳感器主要用來收集培養(yǎng)物中的pH數(shù)據(jù)、溶氧(DO)值、CO2濃度、溫度以及細(xì)胞活力等數(shù)據(jù)。一、PH傳感器的應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)過程中，隨著培養(yǎng)基的分解和細(xì)胞產(chǎn)物的不斷累積，罐內(nèi)的環(huán)境PH值也不斷變化，如果反應(yīng)器內(nèi)的PH值偏高或偏低都會對細(xì)胞的生長及細(xì)胞活力造成嚴(yán)重的影響，。所以通過PH傳感器可以實時了解生物反應(yīng)器內(nèi)的PH值及培養(yǎng)基營養(yǎng)成分的變化，以便及時有效地進(jìn)行PH環(huán)境調(diào)節(jié)。在生物反應(yīng)器中由于傳感器屬于實時傳送測量數(shù)據(jù)，探頭需要長期接觸高溫、高濕度

pcr擴(kuò)增的原理和具體實驗步驟2022/07/27

pcr擴(kuò)增的原理和具體實驗步驟PCR實驗是分子生物學(xué)中常見用的實驗之一，在基因擴(kuò)增、核酸檢測、基因檢測等方面廣泛應(yīng)用。pcr擴(kuò)增的原理和步驟如下：一、試劑準(zhǔn)備：PCR常用的試劑主要包括DNA模板、引物、ddH2O、DNA聚合酶以及特定的反應(yīng)緩沖液、dNTP、MgSO4（可選）和DMSO（可選）。二、PCR實驗前的準(zhǔn)備在開始PCR實驗之前，必須準(zhǔn)備好DNA模板（基因組DNA或逆轉(zhuǎn)錄制備的cDNA）、特異性引物（自己設(shè)計或用軟件設(shè)計），并選擇合適的商業(yè)酶（選擇符合您實驗?zāi)康牡拿?1.DNA聚合酶。有

細(xì)胞遺傳學(xué)分析中淋巴細(xì)胞微核測定方法介紹2022/07/26

細(xì)胞遺傳學(xué)分析中淋巴細(xì)胞微核測定方法介紹淋巴細(xì)胞微核測定是細(xì)胞遺傳學(xué)分析中常用的方法之一,通過微核率的高低可以有效判斷染色體畸變率與輻射損傷。一、淋巴細(xì)胞分離分離使用Ficoll-Paque密度梯度分離淋巴細(xì)胞。將血液用磷酸鹽緩沖鹽水按1:1稀釋，并在Ficoll-Paque上分層，血液+PBS:Ficoll的比例保持為4:3。血液在室溫下以1800rpm離心35分鐘。去除淋巴細(xì)胞層（血沉棕黃層）并在PBS中以1200rpm洗滌兩次，每次10分鐘，然后用培養(yǎng)基RPMI1640洗滌。用血細(xì)胞計數(shù)器

發(fā)酵罐中316L與304不銹鋼在材質(zhì)及應(yīng)用領(lǐng)域上的區(qū)別2022/07/26

發(fā)酵罐中316L與304不銹鋼在材質(zhì)及應(yīng)用領(lǐng)域上的區(qū)別隨著生物技術(shù)及生物制藥的不斷發(fā)展，當(dāng)前小分子藥物、基因工程藥物等創(chuàng)新藥層出不窮，生物反應(yīng)器、不銹鋼發(fā)酵罐等制藥設(shè)備也被廣泛應(yīng)用。那么藥企車間里的制藥設(shè)備制藥企業(yè)的不銹鋼發(fā)酵罐是什么材質(zhì)的呢？是否一定全部要使用316L材質(zhì)的？其實這個問題制藥看是否直接參與制藥生產(chǎn)的反應(yīng)過程了，雖然政策沒有嚴(yán)格要求藥企的所有設(shè)備均采用316L類型的不銹鋼材質(zhì)，但是大多數(shù)還是選擇該型號。個人認(rèn)為，制藥設(shè)備是否采用316L材質(zhì)的不銹鋼主要還是要根據(jù)產(chǎn)品的性能及用途來

細(xì)胞培養(yǎng)過程中的常見問題及解決方案2022/07/25

標(biāo)簽：細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)液氮培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)實驗中的基礎(chǔ)實驗，在細(xì)胞生長過程中，很多因素都會造成細(xì)胞生長不良。下面簡單歸納一下細(xì)胞生長不良的原因及對應(yīng)的解決方案。常見問題一：為什么細(xì)胞解凍后缺少活力，活細(xì)胞占比較低？這種現(xiàn)象可能主要由以下幾種原因所導(dǎo)致：1.培養(yǎng)物凍存液等質(zhì)量欠缺。解決方案：a.確保用來制備儲存物（凍存液）的起始培養(yǎng)物需要保證其健康、無微生物污染、處于生長對數(shù)期后期狀態(tài)。b.收獲細(xì)胞時需要小心翼翼，避免細(xì)胞損傷。2.儲存物凍存方法不當(dāng)解決方案：a.在液氮冷凍細(xì)胞時，確保細(xì)胞、培

PCR擴(kuò)增儀的原理及擴(kuò)增實驗中存在的問題2022/07/22

標(biāo)簽：pcr擴(kuò)增熒光定量pcr定量pcrpcr儀pcr實驗室PCR擴(kuò)增儀基因擴(kuò)增儀PCR檢測方法有很多，其中PCR擴(kuò)增儀又稱為“PCR儀”，它是PCR實驗中*的實驗室設(shè)備之一。PCR儀器大致可以分為三類：即：普通PCR儀，熒光定量PCR儀，梯度PCR儀和原位PCR儀等。一、PCR的原理在pcr擴(kuò)增實驗中，PCR反應(yīng)過程實質(zhì)就是DNA按模板復(fù)制而發(fā)生的聚合酶鏈反應(yīng)的過程，主要包括引物、dNTP、DNA靶序列、DNA聚合及PH緩沖液體系。PCR反應(yīng)過程如下：1.通過升溫反應(yīng)體系混合物一般為：94℃/

分光光度計常見問題匯總2022/07/22

分光光度計是分子生物學(xué)中較為常見的儀器，是利用光譜成像，分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)核酸、BCA等物定量操作。分光光度計主要由發(fā)光源組件、單色器組件、樣品空間、CCD檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。常見的問題主要有以下幾點：一、儀器顯示數(shù)值無法歸零。這種情況往往可能是由于儀器存放條件或使用條件不當(dāng)造成光電管暗盒受潮、內(nèi)部電路板短路等情況所導(dǎo)致。所以平時儀器應(yīng)當(dāng)放在陰涼干燥的環(huán)境中，暗盒中存放適量的干燥劑，使儀器保持干燥的狀態(tài)，切勿長期存放在在濕熱環(huán)境中，長時間不使用時可以斷掉電源

搖瓶在微生物種子制備工藝中的應(yīng)用2022/07/21

搖瓶在微生物種子制備工藝中的應(yīng)用標(biāo)簽：搖瓶緩沖液微生物種子制備搖瓶種子即接種在搖瓶內(nèi)用于搖瓶發(fā)酵試驗或發(fā)酵罐生產(chǎn)的微生物菌種。用于接種傳代第一代的種子稱為“母瓶”，用于接種傳代第二代的種子就叫做“子瓶”。“母瓶”和“子瓶”均可應(yīng)用在微生物發(fā)酵罐進(jìn)行規(guī)模擴(kuò)培傳代培養(yǎng)。一、培養(yǎng)基制備在搖瓶中進(jìn)行種子制備的主要目標(biāo)是培養(yǎng)強生長活性的營養(yǎng)菌體，所以在配制培養(yǎng)基階段必須以滿足菌體生長要求為目的。比如在培養(yǎng)基中添加足量的營養(yǎng)物質(zhì)，包括碳、氮源、緩沖液、無機鹽和生長因子等物質(zhì)。在培養(yǎng)基中添加緩沖液的主要作用是

如何正確使用多道移液器進(jìn)行移液操作2022/07/21

如何正確使用多道移液器進(jìn)行移液操作多道移液器常用的主要有8道移液器、12道移液器和96道移液器。如何正確使用多道移液器進(jìn)行移液操作？使用多道移液器進(jìn)行移液操作時，為避免污染，需要先對移液器及實驗臺面進(jìn)行消毒。消毒后再進(jìn)行移液相關(guān)操作。1.安裝吸頭：如果實驗使用的是袋裝吸頭，需要人工將吸頭擺放在吸頭盒中，對實驗效率要求高的用戶，也可以使用移液器吸頭裝盒神器進(jìn)行裝盒操作（只適用于部分品牌吸頭）。盒裝吸頭則只需打開盒蓋，即可輕松安裝吸頭，在安裝洗頭時需要注意的是要保證移液器與吸頭之間緊密貼合。注意不要

PCR方艙實驗室結(jié)構(gòu)布局與設(shè)計概述2022/07/20

PCR方艙實驗室結(jié)構(gòu)布局與設(shè)計概述2020年突如其來的一場疫情持續(xù)了1年多的時間依然肆虐。隨著2020年01月26日我國的PCR方艙實驗室建設(shè)完成后，各地也都在竭力研究新型的PCR方艙實驗室的設(shè)計與建造。由于方艙實驗室多數(shù)采用模塊化設(shè)計，組裝建設(shè)時間短，移動方便，節(jié)約成本，經(jīng)濟(jì)快速等特點深受歡迎。方艙實驗室的核心艙跟普通的PCR實驗室的結(jié)構(gòu)布局基本上是一致的，主要可分為5個區(qū)，依次為試劑配置區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)，和每個區(qū)獨立的緩沖間所構(gòu)成。1.試劑配置區(qū)：試劑配置區(qū)主要用于配置

實驗室洗瓶機與人工清洗相比有哪些優(yōu)勢？2022/07/20

實驗室洗瓶機與人工清洗相比有哪些優(yōu)勢？實驗后的實驗器皿、玻璃燒瓶、容量瓶、移液管、錐形瓶、試管等玻璃器皿手工清洗較為麻煩，既浪費人工又浪費時間。對于小型實驗室來說，一周幾十只瓶子或許還能忙得過來，但是對于科研機構(gòu)、生產(chǎn)企業(yè)實驗室來說，每周需要清洗的瓶子可能達(dá)到數(shù)百只以上，有的甚至專雇清潔人員進(jìn)行洗瓶操作。人工洗瓶，除了花費時間人工成本外，烘干問題、清潔殘留問題、易碎品安全問題層出不窮，實驗室全自動洗瓶機的問世輕松解決了這些煩惱。洗瓶機實驗室洗瓶機PK人工清洗實驗室洗瓶機一般采用半自動或全自動洗瓶

實驗室冰箱出現(xiàn)故障怎么辦？2022/07/19

實驗室冰箱出現(xiàn)故障怎么辦？實驗室冰箱是生命科學(xué)實驗室的常用儀器設(shè)備，主要儲存低溫生物制品盒生物試劑等，當(dāng)實驗室冰箱出現(xiàn)故障時，大家難免有些驚慌失措。下面小編就帶你了解一下中科美菱品牌的冰箱出現(xiàn)故障后的報修流程，記得收藏，以備不時之需哦！一、中科美菱冰箱的故障報修流程以下報修流程適用于中科美菱實驗室冰箱，醫(yī)療冰箱以及普通家用冰箱。1.電話預(yù)約工程師。全國統(tǒng)一服務(wù)熱線，簡要描述故障，預(yù)約工程師維修。2.故障檢測，預(yù)估報價。工程師進(jìn)行故障診斷后，提出維修方案并預(yù)估報價。3.故障排除，客戶驗收。工程師針

常見用于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基配比方案2022/07/19

常見用于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基配比方案培養(yǎng)基是生物細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)的重要營養(yǎng)基質(zhì)。動物細(xì)胞在生物反應(yīng)器中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時主要采用懸浮培養(yǎng)方式，用于懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基主要有以下幾種：一、平衡鹽溶液：平衡鹽溶液簡稱BSS,它在細(xì)胞培養(yǎng)過程中主要為細(xì)胞提供微量的無機鹽，起調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH、維持滲透壓平衡等作用。常用來作為洗滌液或配置稀釋培養(yǎng)基使用。實驗中常用的平衡鹽溶液有NaCl溶液，Hanks，Earle’s平衡鹽，PBS緩沖液等。一般情況下，配制細(xì)胞消化液或者洗滌細(xì)胞時會采用Hanks或PBS，因為這兩

紫外分光度法進(jìn)行蛋白定量的實驗方法2022/07/19

紫外分光度法進(jìn)行蛋白定量的實驗方法蛋白定量是蛋白質(zhì)檢測過程中的重要環(huán)節(jié)，檢測的方法有很多，有Bradford檢測法、Bradford斑點試驗法、Coomassie斑點試驗法、紫外分光度檢測法。其中、紫外分光度法是蛋白質(zhì)定量方法中比較快的一種方法。一、紫外分光光度法進(jìn)行蛋白定量的檢測原理：由于蛋白質(zhì)分子對于不同光度波段的吸光率也有所不同，所以紫外分光度檢測法主要通過光系統(tǒng)來檢測蛋白分子的吸光率，從而確定蛋白質(zhì)的濃度進(jìn)行的蛋白定量。比如205nm的光波波長主要吸光為肽鏈分子。280nm波長下色氨酸與