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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪干采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪干經CD29、CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠棕色脂肪干原代細胞 | 組織來源 | 脂肪組織 |
英文名稱 | Mouse Brown Adipose Stem Cells | 貨號 | YS-01X7664 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠棕色脂肪干細胞分離自棕色脂肪組織；動物體內存在棕色和白色兩種脂肪，白色脂肪堆積在皮下，負責儲存多余熱量；棕色脂肪負責分解引發肥胖的白色脂肪，將后者轉化成二氧化碳、水和熱量，本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色，其特點是組織中有豐富的毛細血管，脂肪細胞內散著許多小脂滴，線粒體大而豐富，核圓形，位于細胞中央，這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少，新生兒及冬眠動物較多，在新生兒主要分布在肩胛間區、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發揮作用，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫。隨著年齡增長，棕色脂肪會逐漸消失。終，動物體內只殘存少量棕色脂肪細胞，分布于頸部和鎖骨。脂肪干細胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的干細胞，主要恢復組織細胞的修復功能，促進細胞的再生，恢復年輕面容的同時，身體機能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等疾病，由內而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優點：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對供區的創傷較小；④獲得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領域中理想的種子細胞。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
C127細胞，小鼠細胞 Y1(腎上腺皮質細胞) 人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | 核糖體蛋白L15抗體 |
WD重復膜蛋白19抗體 | 細胞纖毛內轉運同源蛋白20抗體 |
泌乳升高蛋白1抗體 | 凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端） |
上腺皮質發育異常同源蛋白抗體 | 驅動蛋白2抗體 |
血管緊張素轉換酶2抗體 | 鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 |
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標簽) | 腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
CA46細胞，人Butts淋巴瘤細胞系 小鼠Lewis肺癌瘤株,LLT細胞 人肝臟星形細胞裂解物HHSteCL | NCI-H295R(人腎上腺皮質腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人食道上皮細胞RNAHEEpiC miRNA5 μg | 人永生化淋巴細胞;CNLMG-B5537LC |
人子宮平滑肌細胞培養基 100mL | CL-0305SF-295(人XG惡性膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2 前列腺癌細胞，22RV1細胞 MDCK superdome細胞，狗腎細胞隆突型 | 小鼠棕色脂肪干原代細胞凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端） |
猴源細胞 | CHL/IU[CHL-11]細胞，中國倉鼠肺細胞 人胰腺癌細胞,PANC-1細胞 CM-R085大鼠表皮角化細胞培養基100mL |
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) | IAR20(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CM-R118大鼠虹膜色素上皮細胞培養基100mL | 鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 |
鈣依賴分泌激活蛋白1抗體 | 人小膠質細胞RNAHM miRNA5 μg |
原始廣泛存在蛋白1抗體 | 丙型肝炎病毒NS5B抗體 |
類狀瘤病毒31 E7抗體 | CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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