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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的小鼠終板軟骨采用膠原酶 - 蛋白酶聯合消化并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的小鼠終板軟骨經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠終板軟骨原代細胞 | 組織來源 | 椎間盤 |
英文名稱 | Mouse Endplate Chondrocyte Cells | 貨號 | YS-01X8547 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠終板軟骨細胞分離自椎間盤終板軟骨組織；椎體終板是椎體在生長發育過程中，椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板，呈輕度凹陷，即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋，并終生存在，即為軟骨終板，上下軟骨終板與髓核和纖維環連接共同構成椎間盤。椎體終板構成了椎間盤的上下邊界，位于椎體中心的松質骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當的覆蓋其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體，同時具有平衡分散應力的作用。成熟的終板軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內，這些終板軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，終板軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，終板軟骨細胞收縮為不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的終板軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
培養信息：
包被條件：
培養基：含FBS、EGF、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每3-4天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：梭形、多角形
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠終板軟骨細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
HuT78細胞，T淋巴細胞白血病細胞 惡性黑色素瘤,A375細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;HH-01 | 核糖核酸酶L抑制蛋白抗體 |
UBX結構域域蛋白D2抗體 | 細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子抗體 |
錨定蛋白G抗體 | 電子轉移黃素蛋白α抗體 |
組織特異性F肌動蛋白結合蛋白2抗體 | 氫離子轉運ATP合成酶6G抗體 |
血管緊張素Ⅱ抗體 | 鉀/超極化激活環核苷酸門控通道蛋白2抗體 |
615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615 | 嬰兒真皮成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
THP-1細胞，人單核細胞白血病細胞 BALB/C小鼠肝上皮細胞,BNL1ME A.7R.1細胞 角質細胞生長添加物(不含動物成分)KGS-acf | NCI-H209(人小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人骨骼肌細胞RNAHSkMC miRNA5 μg | 人胚腎上皮細胞系;KiMA |
恒河猴腎細胞;RM-3 | 猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1 |
兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2 癌細胞，MDA-MB-231細胞 J774A.1細胞，小鼠單核巨噬細胞 | 小鼠終板軟骨原代細胞電子轉移黃素蛋白α抗體 |
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7 | CDH6 Others Mouse 小鼠 Cadherin-6 / CDH6 人細胞裂解液 (陽性對照) |
RAW 264.7細胞，小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3 | 小鼠胎兒真皮成纖維細胞培養基 100mL |
表皮角化細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 調節中心體分離早期相關激酶BORA抗體 |
鈣調酸酶抗體 | PANC-1, 人胰腺癌細胞 Human |
原鈣粘附蛋白α4抗體 | 丙型肝炎NS4B（65kDa）抗體 |
類皰疹病毒8抗體 | 615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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