詳細介紹
小鼠外周血淋巴原代細胞
小鼠外周血淋巴細胞分離自外周血;所謂的外周血,即除骨髓之外的血液,就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血,它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細胞或未被釋放入循環(huán)的血細胞。外周血淋巴細胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡稱PBL,主要是血液循環(huán)中的淋巴細胞,由T細胞和B細胞組成,其中T細胞(占70%~80%)和B細胞(占20%~30%)。
英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Lymphocyte Cells | 組織來源 | 外周血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7625 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠外周血淋巴細胞
組織來源:外周血
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠外周血淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠外周血淋巴經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
QGY-7701細胞,肝癌細胞 人宮頸上皮細胞癌,Ski細胞 KM小鼠子瘤株;U27 | 核孔蛋白NUP160抗體 |
Toll樣受體8抗體 | 嘧啶P450 2C9抗體 |
脈周蛋白1抗體(胃癌抗原蛋白Ga50) | 低密度脂蛋白抗體 |
性舞蹈病蛋白抗體 | 羥抗體 |
胸肽α1抗體 | 甲精結合蛋白3抗體 |
小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929] | 人肺成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
OCM-1細胞,人眼脈絡黑色素瘤細胞 繩狀青霉 小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49) | ANGPTL5 Protein Human 重組人 ANGPTL5 蛋白 (GST 標簽) |
人腦血管平滑肌細胞HBVSMC | MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記)) 5×106cells/瓶×2 |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1 | CL-0276H-97(人高轉移肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
HEL細胞,人紅白細胞白血病細胞 小鼠腎集合管細胞(SV40轉化),M-1細胞 成纖維細胞培養(yǎng)基FM-acf | 小鼠外周血淋巴原代細胞低密度脂蛋白抗體 |
恒河猴皮膚細胞;RM-S1 | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL |
Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(液) 100ml | 牛源細胞 |
人胰島β細胞培養(yǎng)基 100mL | 糖基轉移酶28家族1抗體 |
鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體 | 人胃平滑肌細胞HGSMC |
原鈣粘蛋白β4抗體 | 表皮源性蛋白6抗體 |
酪酶相關蛋白1抗體 | 小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929] |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。