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兔直腸平滑肌原代細胞

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  • 品牌

    上研生
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    上海市

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更新時間:2025-05-19 14:02:22瀏覽次數:53

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?
貨號 YS-01X8482 應用領域 化工,生物產業
主要用途 僅供科研實驗    
兔直腸平滑肌原代細胞公司出售的產品:人原代甲狀腺濾泡上皮細胞 MDBK(牛細胞) AtT-20 小鼠垂體瘤細胞 1ml/T75 Panc10.05 胰腺腺癌 SK-OV-3 人癌細胞 小鼠原代腸巨噬細胞

詳細介紹

本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔直腸平滑肌原代細胞

方法簡介

實驗室分離的兔直腸平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔直腸平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

兔直腸平滑肌原代細胞

組織來源

直腸

英文名稱

Rabbit Rectal   Smooth Muscle Cells

貨號

YS-01X8482

產品規格

5×10?Cells/T25培養瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

兔直腸平滑肌細胞分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以門而終。直腸上端的大小似結腸,其下端擴大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,下端變細接管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側。直腸平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式;腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產生,這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性。利用腸平滑肌細胞的培養,可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結締組織對平滑肌細胞的反應。

兔直腸平滑肌原代細胞

培養信息:

兔直腸平滑肌原代細胞

培養基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態:成纖維細胞樣

傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液:0.25%

培養條件:氣相:空氣,95%CO25%

兔直腸平滑肌細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。

兔直腸平滑肌原代細胞

細胞培養方法:

兔直腸平滑肌原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

操作步驟:

兔直腸平滑肌原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產品:兔直腸平滑肌原代細胞


293T細胞,人胚腎T細胞   人卵巢癌細胞,HO-8910細胞 人心肌細胞裂解物HCML

骨形態發生蛋白15抗體

Ras相關區域家族蛋白4抗體

細胞分裂周期蛋白16抗體

酸肌醇0脂酶PLCZ1抗體

蛋白Z抗體

保護肽HN抗體

胚胎發育相關蛋白Nodal抗體

鋅指蛋白274抗體

肌側索硬化癥相關蛋白FIG4抗體

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1

人結腸粘膜上皮細胞培養基 100mL

RAW 264.7細胞,小鼠單核巨噬細胞白血病細胞   溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3

CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標簽)

小鼠胎兒真皮成纖維細胞培養基 100mL

白細胞介素-17超家族

腦動脈血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

CL-0196RKO(人結腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

EL4小鼠淋巴瘤細胞 EL4   mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

兔直腸平滑肌原代細胞蛋白Z抗體

肝內膽管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer   RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

人羊膜上皮細胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原細胞 Mouse

Hep B1.2(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠子宮成纖維細胞培養基 100mL

死亡相關蛋白1抗體

非受體酪蛋白激酶2抗體

人腎上腺皮質癌細胞;SW-13

異質核糖核蛋白U2樣蛋白抗體

白細胞介素-19抗體

抗菌肽/天蠶素抗體

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1

 

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