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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔輸卵管上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔輸卵管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔輸卵管上皮原代細胞 | 組織來源 | 輸卵管 |
英文名稱 | Rabbit Fallopian Tube Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X8056 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔輸卵管上皮細胞分離自輸卵管組織；輸卵管位于子宮底兩側(cè)，包裹在子宮闊韌帶上緣內(nèi)。自子宮兩角分別伸展至左、右卵巢，是輸送卵細胞進入子宮的管道，也是卵受精的場所。輸卵管主要分漏斗部、壺腹部、峽部和子宮部，管壁均由粘膜、肌層和漿膜三層組成。粘膜形成許多縱行而分支的皺襞，壺腹部的皺襞發(fā)達，高而多分支，故管腔不規(guī)則；至子宮部的皺襞漸減少。粘膜上皮為單層柱狀。由纖毛細胞和分泌細胞組成。纖毛細胞以漏斗部和壺腹部多，至峽部和子宮部逐漸減少，纖毛向子宮方向擺動，使卵移向子宮并阻止病菌進入腹膜腔.分泌細胞表面有微絨毛，頂部胞質(zhì)內(nèi)有分泌顆粒，其分泌物構(gòu)成輸卵管液。輸卵管上皮細胞在卵巢雌激素和孕激素的作用下，隨月經(jīng)周期而有變化。雌激素促進輸卵管上皮細胞的生長的功能活動，在子宮內(nèi)膜增生晚期（排卵前）。纖毛細胞變成高柱狀，纖毛增多，分泌細胞頂部充滿分泌顆粒，功能旺盛。至分泌晚期，兩種細胞均變矮，分泌細胞的分泌顆粒排空，纖毛細胞的纖毛也減少。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔輸卵管上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32 | 叉頭蛋白G1抗體 |
鞘脂激活蛋白3抗體 | 載脂蛋白A1抗體 |
β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體（X11β） | 前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體 |
酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體 | 叉頭蛋白G1抗體 |
前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體 | 載脂蛋白A1抗體 |
XCL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0393NCI-H209(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞;VERO |
人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞株;PG-BE1 | PON3 Others Human 人 PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
PCSK9 Others Human 人 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD48 Others Human 人 CD48 / BCM1 / SLAMF2 人細胞裂解液 (陽性對照) | PDCD1LG2 Others Cynomolgus 食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R116大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 兔輸卵管上皮原代細胞前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體 |
VEGFA Others Mouse 小鼠 VEGFA / VEGF164 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 人星形膠質(zhì)細胞 |
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WPS1 | hMoCD14+-PB single donorpre-screened Pellet 人類外周血CD14+單核細胞團塊單一來源，預(yù)選型 > 1 mio.cells 人脊髓星形膠質(zhì)細胞RNAHA-sp miRNA5 μg |
ERA-2細胞，人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞 人癌阿耐藥細胞株,MCF/Adr細胞 臺盼藍TB | X三體綜合征相關(guān)蛋白FUNDC1抗體 |
酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體 | ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
鞘脂激活蛋白3抗體 | β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體（X11β） |
X三體綜合征相關(guān)蛋白FUNDC1抗體 | XCL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
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