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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔視網膜節采用-膠原酶聯合消化法，結合視網膜節細胞專用培養基培養和化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔視網膜節經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔視網膜神經節原代細胞 | 組織來源 | 視網膜 |
英文名稱 | Rabbit Retinal Ganglion Cells | 貨號 | YS-01X8436 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔視網膜節細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、節細胞層、纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視乳頭。視網膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的纖維跨越視網膜表面，經由視到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力強。視網膜節細胞貼壁后呈單層排列，部分細胞聚集成團，細胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對透明，有些細胞膜上伸出短而小的突起；該細胞為高度分化細胞，在體外屬于不增殖群。視網膜節細胞是青光眼病理性損害的主要細胞，視網膜節細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷，研究視網膜節細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發病機制的研究。
培養信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養基：基礎培養基，含FBS、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：元細胞樣
傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔視網膜節細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
人結直腸腺癌細胞;HT-29 大鼠子宮平滑肌細胞培養基 100mL | 酸化細胞質膜微囊蛋白-1抗體 |
酸化肌醇聚酸鹽酸酶樣蛋白1抗體 | 滋養層細胞抗原3β-HSD抗體 |
重組蛋白G抗體 | 酸化色羥化酶抗體 |
轉錄共激活因子130抗體 | 酸化細胞質膜微囊蛋白-1抗體 |
酸化色羥化酶抗體 | 滋養層細胞抗原3β-HSD抗體 |
FO 小鼠骨髓瘤細胞 | MDA-MB-468 人癌細胞 |
HCC827人非小細胞肺癌細胞 HCC827 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | SCGB1A1 Protein Human 重組人 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標簽) |
少突膠質細胞培養基OM | EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0920 |
原代成纖維細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
非洲綠猴腎細胞;CV-1 體胚肺細胞，WI-38細胞 SHG-44(膠質瘤細胞) | 兔視網膜神經節原代細胞酸化色羥化酶抗體 |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2 | LAG3 Others Rat 大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SiHa人子宮頸鱗癌細胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培養基(GIBCO)+10%FBS | 腎系膜細胞培養基MCM |
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 | 酸化轉錄因子3抗體 |
轉錄共激活因子130抗體 | COS-1(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞) 5×106cells/瓶×2 |
酸化肌醇聚酸鹽酸酶樣蛋白1抗體 | 重組蛋白G抗體 |
酸化轉錄因子3抗體 | FO 小鼠骨髓瘤細胞 |
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