詳細介紹
兔前列腺基質原代細胞
兔前列腺基質細胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對的實質性器宮,由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構成精液主要成分;作為內分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。常見疾病為良性前列腺增生,在病理學上良性前列腺增生癥又稱前列腺結節(jié)狀增生,是前列腺中常見的產(chǎn)生癥狀的瘤樣病變,結節(jié)開始發(fā)生可能是基質細胞自發(fā)逆轉至胚胎階段,其生長潛力可能是基質-上皮之間的相互協(xié)同作用所致,終形成前列腺增生。基質細胞是器官中結締組織細胞,起到為器官中實質細胞提供支持和營養(yǎng)的作用,成纖維細胞、炎癥細胞、免疫細胞以及周皮細胞都是常見的基質細胞類型。基質細胞和腫瘤細胞的相互作用在腫瘤細胞的生長過程中具有重要作用。體外培養(yǎng)前列腺基質細胞對治療前列腺增生有重要的研究意義。
英文名稱 | Rabbit Prostate Stromal Cells | 組織來源 | 前列腺 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8417 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔前列腺基質細胞
組織來源:前列腺
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔前列腺基質細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔前列腺基質采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔前列腺基質經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠肺腺癌低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);LA1-GFP | FAM50A蛋白抗體 |
溶酶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體 | 酸化自噬相關蛋白3抗體 |
肌動蛋白結合蛋白LIM3抗體 | 尤文肉瘤FLI1蛋白抗體 |
蛋白激酶A2抗體 | FAM50A蛋白抗體 |
尤文肉瘤FLI1蛋白抗體 | 酸化自噬相關蛋白3抗體 |
CD3D & CD3E Others Human 人 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) | TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肝癌細胞;SMMC-7721 | (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA1 | |
GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結轉移癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細 | HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM932 | 兔前列腺基質原代細胞尤文肉瘤FLI1蛋白抗體 |
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) | Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞 |
犬腎細胞系/IgR;MDCK/IgR | FAS Others Mouse 小鼠 FAS / TNFRSF6 / CD95 人細胞裂解液 (陽性對照) |
615小鼠癌瘤株;Ca759 小鼠卵巢上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 脂肪酸結合蛋白5抗體(上皮細胞型) |
蛋白激酶A2抗體 | ITGA6 & ITGB1 Others Human 人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) |
溶酶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體 | 肌動蛋白結合蛋白LIM3抗體 |
脂肪酸結合蛋白5抗體(上皮細胞型) | CD3D & CD3E Others Human 人 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。