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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
?方法簡介
公司實驗室分離的人心臟纖維原采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人心臟纖維原經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人心臟纖維原原代細胞 | 組織來源 | 心臟組織 |
英文名稱 | Human Cardiac Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X7593 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人心臟纖維原細胞分離自心臟組織；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數的70%，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形，胞質較少，弱嗜酸性，胞核小，染色深。電鏡下可見，細胞中粗面內質網和高爾基體均不發達。當組織受損時，纖維細胞可轉化為成纖維細胞而參與修復過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態的同一種細胞，如在組織損傷后的修復過程中，纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小，呈多角形，胞質較少，弱嗜酸性，胞核亦較小，染色較深，電鏡下粗面內質網較少，高爾基復合體不發達。成纖維細胞較大，呈星形或梭形，有突起，細胞核呈卵圓形，染色質稀疏，染色淡，核仁明顯，胞質較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖，形成膠原纖維、彈性纖維和網狀纖維以及基質成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成，當心肌損傷時能產生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細胞可重新轉變為幼稚的成纖維細胞，其功能活動也得以恢復，參與組織損傷后的修復。因此，對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現代心血管領域研究的一個重點。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
L6大鼠成肌細胞 L6 rat skeletal myoblasts DMEM培養基+10%FBS | ALS2CR1： 肌側索硬化癥相關蛋白1抗體 0.2ml |
Anti-Heparanase 乙酰肝素酶抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABC2/C17orf71 癌增強蛋白2抗體 規格 0.2ml |
Anti-Caveolin-3/FITC 熒光素標記細胞質膜微囊蛋白-3抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ID1 DNA結合抑制因子1抗體 規格 0.1ml |
IRS-1 胰島素受體底物-1(抗原) 0.5mg | HHV8 ORF50： 人類皰疹病毒8抗體 0.2ml |
IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗羊IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM107A 腎細胞癌下調蛋白1抗體 規格 0.2ml |
IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標簽) | CL-0382MDA-MB-415(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620] 大鼠真皮成纖維細胞培養基 100mL | EAC 小鼠艾氏腹水癌細胞 |
大鼠腦成纖維細胞培養基 100mL | IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Ierleukin-28B 蛋白 (His 標簽) |
大鼠腎系膜細胞培養基 100mL | Chang liver (CCL13) (人張氏肝細胞) 5×106cells/瓶×2 |
Super Tube狗腎細胞 Super Tube canine kidney cells D-MEM/F-12培養基(GIBCO)+10%FBS | 人心臟纖維原原代細胞Rhesus antibody Rh ID1 DNA結合抑制因子1抗體 規格 0.1ml |
NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細胞裂解液 (陽性對照) |
P3X63Ag8細胞，骨髓瘤細胞 人十二指腸腺癌細胞,HuTu-80細胞 CM-H029人臍帶單核細胞培養基100mL | 人表皮角質細胞-HEK-a |
MA, 小鼠星形膠質細胞 | Rhesus antibody Rh sIgA/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗人分泌型IgA 規格 0.1ml |
OSM(Human Oncostatin-M) ELISA KIT 人抑瘤素M 96T | IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標簽) |
CKR-L2( G protein-coupled receptor-2 ) G蛋白偶聯受體-2(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg | CT(Human Calcitonin) ELISA Kit 人降鈣素Multi-class antibodies規格： 48T |
MHC Class II： 組織相容性復合體蛋白2抗體 0.2ml | IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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