詳細介紹
人胎盤絨毛膜原代細胞
人胎盤絨毛膜細胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。絨毛膜是由滋養層和胚外中胚層的壁層構成。胚泡植入子宮內膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細胞滋養層為中軸,外裹合體滋養層,稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當絨毛膜的胚外中胚層內形成血管網和結締組織,并與胚體內的血管相通時,次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養層細胞形成細胞滋養層殼。隨著胚胎發育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
英文名稱 | Human Placental Chorionic Cells | 組織來源 | 胎盤組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7205 |
細胞形態 | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:人胎盤絨毛膜細胞
組織來源:胎盤組織
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯合消化法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人胎盤絨毛膜經hCG免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
KB-C1.5細胞,細胞 人T淋巴瘤轉基因細胞,Jurkat D,E細胞 人喉癌上皮細胞;Hep-2 | AICDA: 活化誘導胞嘧啶核苷脫酶抗體 0.2ml |
Anti-Heme Oxygenase 1/HO-1 血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABCA9 三0酸腺苷結合盒轉運蛋白9抗體 規格 0.2ml |
Anti-cath-H/CH /FITC 熒光素標記組織蛋白酶H抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh IDE 胰島素降解酶抗體 規格 0.2ml |
IRS-4 胰島素受體底物-4(抗原) 0.5mg | HSP1: P1抗體 0.2ml |
IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X 腎母細胞瘤基因X染色體蛋白抗體 規格 0.2ml |
769-P(人腎細胞腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8 |
Bel-7404細胞,人肝癌細胞 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CHO | L1210(小鼠白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 |
骨髓間質干細胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells | WERI-Rb-1(人視網膜膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0270CRT(人膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | EB病毒轉化的人B淋巴細胞(彝族);KM934 |
HS-6細胞,人黑色素瘤細胞 德氏乳桿菌保加利亞亞種 人母細胞瘤細胞;SH-SY5Y | 人胎盤絨毛膜原代細胞Rhesus antibody Rh IDE 胰島素降解酶抗體 規格 0.2ml |
BSC-1(猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 | PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤細胞 Myeloma cells in Y3-Ag 1.2.3 rats DMEM培養基+10%FBS | 人中腦星形膠質細胞HA-mb |
KM小鼠子瘤株;U14 | Rhesus antibody Rh sIgA/PE PE標記的兔抗人分泌型IgA 規格 0.1ml |
LHRH(Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 小鼠黃體生成素釋放激素 96T | 人羊膜間充質基質細胞 Human |
PP-1 蛋酸酯酶-1(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg | ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit 人內皮素1Multi-class antibodies規格: 48T |
phospho-MEK1 (Thr386): 0酸化原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml | 769-P(人腎細胞腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。