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詳細介紹
人臍靜脈平滑肌原代細胞
人臍靜脈平滑肌細胞分離自臍帶組織；它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細胞基礎；血管平滑肌細胞的異常增加的生長潛力在血管疾病發生過程中起決定作用。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物，同時從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細胞方法相對成熟，使得體外培養的臍靜脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。
英文名稱 | Human Umbilical Vein Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 臍帶組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7296 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人臍靜脈平滑肌細胞
組織來源：臍帶組織
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人臍靜脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人臍靜脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C 卵巢癌細胞，HO-8910細胞 CHO/dhFr-細胞，中國倉鼠腎細胞(二氫還原酶缺陷型) | Rhesus antibody Rh GH/Growth Hormone 生長激素抗體 規格 0.1ml |
Human Cyclin-D1 ELISA Kit 人細胞周期素D1Multi-class antibodies規格： 48T | IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IFN gamma： 干擾素-γ/IFN-γ抗體 0.1ml | P III NT ELISA Kit 大鼠Ⅲ型前膠原基端肽 96T |
Rhesus antibody Rh rHPV 重組人瘤病毒抗體 規格 0.2ml | Anti-Langerin/CD207/FITC 熒光素標記白細胞分化抗原CD207抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser416) 0酸化微管相關蛋白抗體 規格 0.1ml | B7-2/sCD86(Human soluble Cluster of differentiation 86) ELISA Kit 人可溶性CD86 96T |
人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2 | KMML1 小白鼠肺成纖維樣細胞 |
CM-H075人腎足突細胞培養基100mL | QBC-939, 人膽管癌細胞 |
膀胱上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | EL4 小鼠淋巴瘤細胞 |
大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1 | 總抗氧化能力檢測試劑盒 TACA |
人上皮細胞;Ca Ski 大鼠腸巨噬細胞培養基 100mL | 人臍靜脈平滑肌原代細胞P III NT ELISA Kit 大鼠Ⅲ型前膠原基端肽 96T |
人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16 | CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H039人小腸粘膜上皮細胞培養基100mL |
A875(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh APOC3 載脂蛋白C3抗體 規格 0.2ml |
Bad： 相關死亡促進因子Bad抗體 0.1ml | 小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6 |
Anti-SRC3/KAT13B/AIB1/FITC 熒光素標記類固醇受體輔助活化因子-3抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | PTP4A2： 肝再生0酸酯酶2抗體 0.2ml |
Anti-CD163/M130/FITC 熒光素標記CD163抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | 人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
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