詳細介紹
人臍帶血造血干原代細胞
人臍帶血造血干細胞分離自臍帶血;臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發現,臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統的造血干細胞,可用于造血干細胞移植,因此,臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結出各種不同的果實——血液細胞、細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量,又可進一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復等方面發揮積極作用。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞,終生成各種血細胞成分,包括紅細胞,白細胞和血小板。造血干細胞需要根據機體的生理需求適時的補充血液系統各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態下,造血干細胞也扮演著調節和維持體內血液系統各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細胞移植廣泛應用于血液系統疾病以及自身免疫疾病,在其它實體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細胞瘤,乳腺癌,小細胞肺癌,主要應用于常規治療失敗或復發難治以及具有不良預后因素的患者。造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖,一個干細胞分裂產生兩個子細胞,一個分化為造血祖細胞,另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養產生大量造血祖細胞同時,保持自己既不增殖也不分化。體外培養微環境合適,造血干細胞可持續維持培養 60 天左右。 造血干細胞體外增殖培養需要基質細胞滋養(滋養層細胞),缺少滋養層細胞不增殖,無法長期培養,本產品為收集培養好的造血干懸浮細胞灌裝發貨,不包含滋養層,因此收貨后建議盡快實驗。
英文名稱 | Human Umbilical Cord Blood Hematopoietic Stem Cells | 組織來源 | 臍帶血 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X8301 |
細胞形態 | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:人臍帶血造血干細胞
組織來源:臍帶血
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
培養基:含FBS、SCF、IL-3、TPO、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態:圓形
傳代特性:不建議傳代
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人臍帶血造血干細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的人臍帶血造血干采用采集臍帶血、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的人臍帶血造血干經CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
恒河猴肺細胞;RM-L1 | TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA KIT 小鼠特異生長因子/相關因子 96T |
RNF93: 環指蛋白93抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體 規格 0.2ml |
Anti-HCV-Core/FITC 熒光素標記丙型肝炎病毒-C區抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | C20orf43: 20號染色體開放閱讀框43抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh BRN3B/POU4F2 腦特定蛋白Brn3B抗體 規格 0.2ml | Anti-CT DNA /FITC 熒光素標記兔抗小胸腺DNA 抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
酪蛋白激酶受體B2抗體 Anti-EphB2 R 0.1ml | ANKK1: 錨定蛋白重復結構域蛋白激酶ANKK1抗體 0.2ml |
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞 | KYSE450 人食管癌細胞 |
CL-0328CEM/C1(人急性淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2 | rEPC,大鼠內皮祖細胞-骨髓 |
膀胱上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | VERO細胞衍生株;SVP |
MRC-5 人胚肺成纖維細胞 | CL-0064CoC1(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
Saos-2細胞,骨肉瘤細胞 人細胞,Hela P10s-11F細胞 人腦微血管內皮細胞總RNAHBMEC NA | 人臍帶血造血干原代細胞C20orf43: 20號染色體開放閱讀框43抗體 0.1ml |
大隱靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | NRK細胞,大鼠腎小管上皮細胞 PT-67(病毒轉染小鼠細胞) 豬腎細胞;PK(15) |
IL13RA2 Others Human 人 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3 |
人小梁網細胞培養基 100mL | IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GTDC1 糖基轉移酶樣1抗體 規格 0.2ml | 人前列腺成纖維細胞RNAHPrF miRNA5 μg |
EGFL8: 表皮生長因子樣蛋白8抗體 0.2ml | Anti-EDG2/LPA1 溶血0脂酸受體蛋白1抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml |
AQP-3(Mouse Aquaporin 3) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白3Multi-class antibodies規格: 48T | SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞 |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。