詳細介紹
人破骨原代細胞
人破骨細胞分離自骨組織和骨髓;破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統,其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發生病理性變化。因此多數學者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結構、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞,屬于不增殖細胞群,不能增殖和傳代,只能進行原代培養且存活時間較短。
英文名稱 | Human Osteoclast Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7352 |
細胞形態 | 多核巨細胞 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:人破骨細胞
組織來源:骨髓
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 多核巨細胞
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人破骨采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人破骨經TRAP染色檢測,純度可達30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
胰腺星狀細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | Anti-TSARG4 生精細胞凋亡相關基因4抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml |
ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit 人堿性0酸酶 96T | Anti-MLCK/FITC 熒光素標記肌球蛋白輕鏈激酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TIP47/M6PRBP1 脂滴相關蛋白TIP47抗體 規格 0.2ml | NOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit 人合成酶Multi-class antibodies規格: 48T |
HEPACAM: 肝細胞粘附分子抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh CCDC106 卷曲螺旋結構域蛋白106抗體 規格 0.2ml |
FAM3B/PANDER: 胰腺衍生因子抗體 0.2ml | ALCAM ELISA Kit 大鼠白細胞活化黏附因子Multi-class antibodies規格: 48T |
IRAK4 Others Human 人 IRAK4 / IRAK-4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 人臍帶靜脈平滑肌細胞 (HUVSMC)( 5×105 ) SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細胞株 Human |
人男性正常細胞;Hs68 | CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CPA1 Others Mouse 小鼠 CPA1 / CPA / Carboxypeptidase A1 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ACVR1B Others Human 人 ALK4 / ACVR1B 人細胞裂解液 (陽性對照) | SFRP2 Others Mouse 小鼠 sFRP2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 | 人破骨原代細胞NOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit 人合成酶Multi-class antibodies規格: 48T |
K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞) 5×106cells/瓶×2 溶組織梭菌Closidium histolyticum | 犬腎細胞;MDCK(NBL-2) |
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標簽) | DMF7細胞,雙位點HC-KIT受體細胞株 人癌高轉移細胞,MDA-MB-435細胞 間充質干細胞培養基MSCM-sf |
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PSAP/PAP/FITC 熒光素標記前列腺酸性0酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
OPCML: 樣物質結合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體 0.1ml | 人臍靜脈內皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304] 人腸靜脈內皮細胞培養基 100mL |
SPHK2: 鞘醇激酶2抗體 0.2ml | Centaurin gamma 1: 中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/FITC FITC標記的驢抗人IgG 規格 0.3ml | IRAK4 Others Human 人 IRAK4 / IRAK-4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。