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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
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方法簡介
公司實驗室分離的人淋巴管內皮采用蛋白酶消化法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人淋巴管內皮經VEGFR3免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人淋巴管內皮原代細胞 | 組織來源 | 淋巴管 |
英文名稱 | Human Lymphatic Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7107 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人淋巴管內皮細胞分離自淋巴管組織；淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態結構與靜脈相似，但管徑較細，管壁較薄，瓣膜較多且發達，外形呈串珠狀。淋巴管根據其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下，常與淺靜脈伴行，收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行，收集肌肉和內臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中，通常經過一個或多個淋巴結，從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液，產生淋巴細胞和漿細胞，參與機體的免疫反應。當局部感染時，細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們，則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴管內皮細胞（LEC）是襯覆于淋巴管內表面的一種單層扁平上皮，是構成淋巴管壁的主要結構，參與維持體液平衡，調節淋巴細胞再循環和機體的免疫反應和組織液及蛋白質的運輸，在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明，LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用，而且與腫瘤轉移密切相關。淋巴管內皮細胞主要功能：①調節體液、蛋白和組織壓力平衡；②為免疫系統的重要組成部分。淋巴管內皮細胞與主要病生理變化：①囊腫型淋巴管瘤；②淋巴管炎；③淋巴結核。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
倉鼠卵巢細胞;Lec1 高轉移卵巢癌細胞，HO-8910PM細胞 SCF細胞，白鰱尾鰭細胞 | ART5： 二0酸腺苷核糖基轉移酶5抗體 0.2ml |
Anti-VSV-G tag VSV-G tag標簽抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABHD13 水解酶結構域蛋白13抗體 規格 0.2ml |
Anti-Caspase-13/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFN gamma 干擾素-γ抗體 規格 0.1ml |
ARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原 0.5mg | Heamachrome： 血紅素抗體 0.2ml |
IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗羊IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM161A FAM161A蛋白抗體 規格 0.2ml |
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2 | mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 |
RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞 STJ.EPI.H7細胞 COS-1(SV40 轉化的非洲綠猴腎細胞) | 人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116] |
CM-M035小鼠肝動脈平滑肌細胞培養基100mL | 小鼠海馬膠質細胞(EGFP標記) Mouse |
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 | 白細胞介素-10超家族 |
小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6 小鼠腮腺細胞培養基 100mL | 人淋巴管內皮原代細胞Rhesus antibody Rh IFN gamma 干擾素-γ抗體 規格 0.1ml |
CT-26 WT 小鼠結腸癌細胞 | PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
團頭魴尾鰭細胞;WCF 人卵巢畸胎瘤細胞，PA-1細胞 SK-OV-3(卵巢癌細胞) | 子宮內膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞 | Rhesus antibody Rh IgG/Bio 標記的兔抗長爪沙鼠IgG 規格 0.1ml |
SDF-1a/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit 小鼠基質細胞衍生因子1a 96T | COLO 320(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1Multi-class antibodies規格： 0.5mg | TRH(Human growth hormone releasing hormone) ELISA Kit 人促甲狀腺素釋放激素Multi-class antibodies規格： 48T |
MyoGEF： 肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 0.2ml | 人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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