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詳細介紹
人肝動脈平滑肌原代細胞
人肝動脈平滑肌細胞分離自肝動脈組織；在胚胎期，肝臟有3條動脈供血，分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈，這3條動脈分別的不同部位。出生后，一般保留一條動脈，大部分為起源于腹腔動脈的動脈，由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況，如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈（25%），起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈（10%），而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外，還有5%像胚胎期一樣，3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈，如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時，此種異位起源的肝動脈稱替代動脈，如果在常見肝動脈類型外，還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流，這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈平滑肌細胞是肝動脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。肝動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素，新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應，并且與血管疾病的發展及穩定性有關。
英文名稱 | Human Hepatic Artery Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 肝動脈組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7180 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人肝動脈平滑肌細胞
組織來源：肝動脈組織
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人肝動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人肝動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
原代系膜細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml | GR- Alpha ELISA Kit 大鼠糖皮質激素受體αMulti-class antibodies規格： 48T |
C1orf183： 1號染色體開放閱讀框183抗體 0.2ml | Phospho-Gab1 (Tyr627)： 0酸化接頭蛋白Gab 1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CFHL1 補體因子H相關蛋白1抗體 規格 0.2ml | PGC1 beta： 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 0.2ml |
Anti-CD337/NKp30/NCR3/FITC 熒光素標記細胞毒性受體NK-p30抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | GPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原 0.5mg |
Goat Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標記羊抗Multi-class antibodies規格： 0.3ml | Phospho-MAP3K8 (Ser400)： 0酸化原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.1ml |
CDK16 Others Human 人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | BCAM Others Human 人 BCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人膀胱平滑肌細胞總RNAHBdSMC NA | IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人細胞裂解液 (陽性對照) | MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MBL1 Others Mouse 小鼠 MBL1 人細胞裂解液 (陽性對照) | RM-1小鼠前列腺癌細胞 RM-1 mouse prostate cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS |
倉鼠腎細胞;HL-1 | 人肝動脈平滑肌原代細胞PGC1 beta： 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 0.2ml |
CV-1細胞，非洲綠猴腎細胞 人大腸癌細胞,SW116細胞 CM-H133人視網膜muller細胞培養基100mL | 人喉癌上皮細胞;Hep-2 |
人APP-PS1雙基因轉染細胞株(HEK293);APP-PS1 | FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MDA-MB-415(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NRK(大鼠腎細胞) | Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC 熒光素標記0酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Anti-RELMa 抵抗素樣分子α抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml | KM小鼠網織細胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細胞培養基 100mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-Gab1 (Tyr659) 0酸化接頭蛋白Gab 1抗體 規格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL7 kelch樣蛋白7抗體 規格 0.2ml |
FT4 游離T4 96T | CDK16 Others Human 人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
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