詳細介紹
雞小腸黏膜上皮原代細胞
雞小腸黏膜上皮細胞分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。
英文名稱 | Chicken Small Intestine Mucosal Epithelial Cells | 組織來源 | 小腸組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7039 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:雞小腸黏膜上皮細胞
組織來源:小腸組織
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
真皮成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | Anti-Transferrin 轉鐵蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml |
HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit 人透明質酸酶 96T | Anti-MIP4/CCL18/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎癥蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TM4SF3 TM4SF3蛋白抗體 規格 0.2ml | MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓過氧化物酶Multi-class antibodies規格: 48T |
HMGCR: 三羥基基還原酶抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDCNL 卷曲螺旋結構域蛋白NL抗體 規格 0.2ml |
FBXL15: FBXL15蛋白抗體 0.2ml | bFGF-6 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子6Multi-class antibodies規格: 48T |
CD46 Others Human 人 CD46 人細胞裂解液 (陽性對照) | 大鼠海馬趾細胞(RHh)(1×106) WM451, 人黑色素瘤細胞 Human |
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] | PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HUVEC-c 單一來源的人臍靜脈內皮細胞(HUVEC) 500,000cells 表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | OMD Others Mouse 小鼠 OMD / Osteomodulin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
成纖維細胞培養基FM-sf | 雞小腸黏膜上皮原代細胞MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓過氧化物酶Multi-class antibodies規格: 48T |
FLT3 Others Human 人 FLT3 / FLK2 / CD135 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人肝竇內皮細胞培養基 100mL |
TM3(小鼠間質細胞) 5×106cells/瓶×2 | 恒河猴腎細胞;MMK2 人腦星型膠質瘤細胞,SW 1088[SW-1088;SW1088]細胞 T-47D(管癌細胞) |
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 熒光素標記0酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
O-GlcNAc transferase: O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗體 0.2ml | CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SRD5A2: 類固醇5α還原酶2抗體 0.1ml | CCP: 瓜酸環肽抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy5 Cy5標記的驢抗兔IgG 規格 0.1ml | CD46 Others Human 人 CD46 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。