大鼠小梁網原代細胞

大鼠小梁網細胞分離自眼球組織；小梁網由角膜基質纖維、后界膜和角膜內皮向后擴展而成，覆蓋在鞏膜靜脈竇的內側。小梁網細胞在眼內壓調節中起著關鍵作用；小梁網細胞內有特定的遞質和肽受體，其中包括腎上腺素、乙酰和肽Y。青光眼是由于眼內壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病，小梁網細胞的體外培養是青光眼病因學研究的重要手段之一。在小梁網細胞中，一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發細胞內信號傳導機制，小梁網細胞可合成不同類型的細胞外基質蛋白以及金屬蛋白酶。形態學觀察可見，剛從組織塊長出的原代細胞，形態各異，多數呈星狀或不規則形。細胞有胞突，核橢圓形，胞體肥大，胞漿豐富，且可見吞噬顆粒。隨著細胞的增生及相互融合為單層，細胞的形態趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失，排列緊密呈類似上皮細胞的扁橢圓形或不規則形。胞體透亮，包膜清晰。

產品名稱：大鼠小梁網細胞

組織來源：眼球

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠小梁網采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠小梁網經NSE（元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

大鼠載脂蛋白B100(APOB100)試劑盒 ，英文名： APOB100 ELISA Kit

Mouse phospholipase A2 (PL-A2) ELISA Kit 小鼠0脂酶A2(PL-A2)試劑盒

MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 小鼠白血病抑制因子(LIF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanFibrinogen,FbgELISAKit人血纖蛋白原

細胞/組織高質化溶酶體分離試劑盒10次

ELISAKitMMP-4大鼠基質金屬蛋白酶4

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒

Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2試劑盒人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)試劑盒規格：96T/48T

植物氨含量熒光定量試劑盒20次

Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規格：96T/48T

小鼠腦衍化營養因子(mouse BDNF)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠腦衍化營養因子受體(mouse BDNF R)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

IGFBP4重組小鼠 IGFBP4 蛋白 Protein

CK19 細胞角蛋白19抗原 0.5mgCK19 細胞角蛋白19抗原

IDH1重組人 IDH1 蛋白 Protein

HIST2H2BE Protein Human 重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白

S100A6 Protein Mouse 重組小鼠 S100A6 蛋白

EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細胞裂解液   CRT(人膠質瘤細胞)     FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細胞裂解液   人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞;OCM-1A 小鼠原代口腔黏膜成纖維細胞 大鼠原代脂肪細胞

大鼠小梁網原代細胞CD72分子(CD72)重組蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)

DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽)

CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CST3 Protein Rat 重組大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白

AZGP1重組人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 蛋白 Protein