大鼠小腸黏膜上皮原代細胞

大鼠小腸黏膜上皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力，促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。

產品名稱：大鼠小腸黏膜上皮細胞

組織來源：小腸組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠小腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠小腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

大鼠載脂蛋白H(APOH)試劑盒 ，英文名： APOH ELISA Kit

Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴細胞因子試劑盒

MouseIerleukin5,IL-5ELISAKIT 小鼠白介素-5(IL-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanfrizzledhomolog8,FZD8ELISAKit人卷曲蛋白8

細胞/組織白蛋白載玻片制備試劑盒20次

ELISAKitTIMP-2大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2

小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 人前列腺素E2(PGE2)試劑盒

Humanadiposediffereiation-relatedprotein,ADRPELISAKit 人脂肪分化相關蛋白(ADRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanadipocytefattyacid-bindingprotein,a-FABP試劑盒人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)試劑盒規格：96T/48T

植物ATP生物發光法定量試劑盒50次

MouseAlanineAminoansferase,ALT/GPTELISAKit小鼠轉氨酶/谷轉氨酶(ALT/GPT)試劑盒規格：96T/48T

小鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺素(T4)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒   96T/48T

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原

IZUMO4重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標簽) Protein

F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

PVRL1 Protein Rat 重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標簽)

ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細胞裂解液   小鼠成纖維細胞(EGFP標記) 人肺癌細胞，SW 900[SW-900; SW900]細胞 P3X63Ag8(骨髓瘤細胞)  REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細胞裂解液 小鼠原代淋巴管內皮細胞 兔原代皮膚成纖維細胞

大鼠小腸黏膜上皮原代細胞N-ras 原癌基因抗原 0.5mgN-ras 原癌基因抗原

EGFL6 Protein Human 重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白

CXCL13重組狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 Protein

FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標簽)

NTRK1重組人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 194-413, His 標簽) Protein