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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠脈絡膜微血管內皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠脈絡膜微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠脈絡膜微血管內皮原代細胞 | 組織來源 | 脈絡膜組織 |
英文名稱 | Rat Choroidal Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7529 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠脈絡膜微血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視神經乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
兔子補體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 人血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒
Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit 人系統性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanE-Selectin試劑盒人E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒規格：96T/48T
組織S6KINASE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit人破骨細胞分化因子(ODF)試劑盒規格：96T/48T
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)試劑盒 ，英文名： CGRP ELISA Kit
Human factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 人凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒
MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子9
細菌同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測試劑20次
rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)試劑盒規格：96T/48T
人樁蛋白試劑盒 人樁蛋白試劑盒 規格型號：96T/48T 人樁蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人樁蛋白試劑盒、人樁蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
人乙脫氫酶試劑盒 人乙脫氫酶試劑盒 規格型號：96T/48T 人乙脫氫酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人乙脫氫酶試劑盒、人乙脫氫酶試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
人 人 規格型號：96T/48T 人，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人、人 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
人心肌錨蛋白重復域1試劑盒 人心肌錨蛋白重復域1試劑盒 規格型號：96T/48T 人心肌錨蛋白重復域1試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：人心肌錨蛋白重復域1試劑盒、人心肌錨蛋白重復域1 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
TGFBR2重組大鼠 TGFBR2 蛋白 Protein
GABA/BSA γ1氨基偶聯牛血清白蛋白 1mgGABA/BSA γ1氨基偶聯牛血清白蛋白
SERPINA6重組人 SerpinA6 / CBG 蛋白 (His 標簽) Protein
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B1/A2) Heterotrimer 蛋白
KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白
CL-0102Hep 3B(人肝癌細胞) 角臘上皮細胞生長添加物CEpiCGS RN-c, 大鼠皮質神經元 Y567[VTT C-79094]細胞 B95-8(EBV 轉化的絨猴白細胞) 人淋巴內皮細胞 KYSE510 食管癌 7. 肺部細胞系統 小鼠原代心肌細胞 人原代子宮平滑肌細胞
大鼠脈絡膜微血管內皮原代細胞GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)
IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標簽)
CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein
IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白
SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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