大鼠瘢痕疙瘩成纖維原代細胞

大鼠瘢痕疙瘩成纖維細胞分離自皮膚瘢痕疙瘩組織；瘢痕疙瘩，俗稱疤痕疙瘩，是皮膚傷口愈合或不明原因所致皮膚損傷愈合后所形成的過度生長的異常瘢痕組織，目前學術界認為各種原因導致的瘢痕如具有以下特點，可診斷為瘢痕疙瘩：①病變超過原始皮膚損傷范圍；②呈持續性生長；③高起皮膚表面、質硬韌、顏色發紅的結節狀、條索狀或片狀腫塊。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的瘢痕疙瘩成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。瘢痕疙瘩成纖維細胞同正常皮膚成纖維細胞在形態上沒有表現出明顯的差異。瘢痕疙瘩成纖維細胞生長同正常皮膚成纖維細胞的生長沒有明顯的差別。癜痕成纖維細胞對血清的依賴性低于正常皮膚成纖維細胞。

產品名稱：大鼠瘢痕疙瘩成纖維細胞

組織來源：皮膚

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠瘢痕疙瘩成纖維細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的優良培養狀態。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒

Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)試劑盒

PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-內肽

血液精(arginine)含量酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次

Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)試劑盒規格：96T/48T

植物D2(VD2)ELISA 試劑盒

Human ai liver cell membrane aibody (LMA) ELISA Kit 人抗肝細胞膜抗體(LMA)試劑盒

PorcineSomatostatin,SSELISAKit 豬(SS)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAFP(MouseAlpha-fetoprotein)ELISAKit小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白

血液纖維蛋白溶酶原激活劑抑制物(PAI)活性化學發光法定量試劑盒20次

Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit小鼠抗復合物(TAT)試劑盒

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小鼠胃腸癌標志物試劑盒   小鼠胃腸癌標志物試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠胃腸癌標志物試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠胃腸癌標志物試劑盒、小鼠胃腸癌標志物試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠lisa試劑盒   小鼠試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠試劑盒、小鼠lisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠網膜素試劑盒   小鼠網膜素試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠網膜素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠網膜素試劑盒、小鼠網膜素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

BMP4(bone morphogenetic protein 4 0.5mgBMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態發生蛋白4(抗原)

KIT重組人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (aa 540-972, His & GST 標簽) Protein

CFD Protein Human 重組人 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白

CSF2RB Protein Rat 重組大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (Fc 標簽)

293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系 Human  CEACAM1 Others Mouse 小鼠 CEACAM1 / CD66a 人細胞裂解液   人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi  T2細胞，轉HLA-2基因B細胞 小鼠癌細胞,MA891細胞 人神經元cDNAHN cDNA 豬原代子宮內膜基質細胞 兔原代背根神經節細胞

大鼠瘢痕疙瘩成纖維原代細胞PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。