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脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)微量法

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更新時間:2022-03-08 14:55:27瀏覽次數:386

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 100管/96樣
貨號 YS-01S6412 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供于科研使用    
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詳細介紹

基本信息:

產品名稱:脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)微量法

測試方法:微量法

規格 : 100管/96樣

貨號:YS-01S6412

測定意義

DHAR存在于細胞質、線粒體和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsA和GSSG,調控細胞AsA/DHA比值,是抗壞血酸-谷胱甘肽氧化還原循環的關鍵酶。提高植物體內的 DHAR 活性,可提高植物食品中AsA含量,進而提高植物食品的營養品質。

測定原理:

DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,通過測定DHA減少速率,計算DHAR活性。

實驗中所需儀器及設備:

研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液器和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實驗

需自配儀器:

1、酶標儀(比色測定波長為450nm)

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)

3、微量移液器

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

下列是公司正在熱銷的產品:

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S100鈣結合蛋白A12(S100A12 )酶聯吸附測定試劑盒枯草芽孢桿β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)

S100鈣結合蛋白A13(S100A13 )酶聯吸附測定試劑盒小孢根霉塊狀變種MOB1 (E1N9D) Rabbit mAb

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