免疫組化顯色試劑盒訂貨信息

通用型免疫組化試劑盒CSK1003，適用于人及動物組織，一抗來源為兔或者小鼠，適用效果與進口品牌對等。

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產品說明書

【產品名稱】

免疫顯色試劑盒（通用4組分）

【產品貨號】

CSK1003-2mL/CSK1003-20mL/ CSK1003-100mL

【主要組成成分】




組成	成分	規格
		CSK1003-2mL	CSK1003-20mL	CSK1003-100mL
試劑1	內源性過氧化物酶封閉劑	2mL	20mL	100mL
試劑2	HRP酶標二抗聚合物	2mL	20mL	100mL
試劑3	DAB底物（20X）	0.1mL	1mL	5mL
試劑4	底物緩沖液	2mL	20mL	100mL






















【預期用途】

該試劑僅供科研使用。主要用于免疫組織化學的顯色反應。

【檢測原理】

此試劑盒是利用抗體與切片中的靶抗原形成抗原抗體復合物，再通過HRP酶標抗小鼠/兔聚合物（以多聚氨基酸為骨架，辣根過氧化物酶與抗小鼠/兔IgG-Fab’片段形成的多聚合物）與抗原抗體復合物中的抗體結合，最后辣根過氧化物酶催化二*基lian苯*（DAB）在抗原部位形成棕色沉淀，并可借助顯微鏡觀察其顏色變化，從而在抗原抗體結合部位確定組織、細胞的結構。

【儲存條件及有效期】

2~8℃儲存，避免冰凍。有效期為12個月。

【檢驗方法】

1.檢驗所需儀器、設備

移液器、免疫組化油筆、計時器、干燥箱、孵育盒、染色架、蓋玻片、光學顯微鏡、洗瓶。

2.溶液配制

DAB顯色液：使用DAB底物緩沖液將DAB底物（20X）稀釋20倍。避光存放，現配現用。

3.試驗溫度條件

室溫，18~25℃

4.實驗步驟

4.1脫蠟和水化

石蠟切片置于新鮮的二甲苯中，浸泡2次，10min/次，；

除去多余的液體后，置于無水乙醇中，浸泡2次，5min/次，；

除去多余的液體后，置于95%乙醇中，浸泡5min；

除去多余的液體后，置于85%乙醇中，浸泡5min；

自來水沖洗3次, 3min/次。

4.2抗原修復：參照一抗抗體說明書進行。

4.3加內源性過氧化物酶阻斷劑

將抗原修復后的切片用自來水沖洗3次，3min/次，用油筆圈定玻片上的待測組織區域，TBS清洗液沖洗1次，3min/次；除去TBS清洗液，在樣本區域加入80-100μL（試劑量視切片大小，以全覆蓋切片組織為宜，前后試劑量保持一致，下同）內源性過氧化酶封閉劑，室溫孵育5min；TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.4加抗體

除去TBS清洗液，加入80-100μL一抗，室溫孵育60min；TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.5加HRP酶標二抗聚合物

除去TBS清洗液，加入80-100μL酶標二抗聚合物，室溫孵育30min。TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.6顯色

除去TBS清洗液，加入80-100μL新鮮配制的DAB顯色液，室溫孵育5min。

4.7復染

自來水沖洗，加80-100μL蘇木素，室溫孵育1-3min；自來水沖洗返藍。

4.8脫水、透明、封片

置于85%乙醇中，浸泡2min；

置于95%乙醇中，浸泡2min；

置于無水乙醇中，浸泡2次,2min/次；

二甲*透明，浸泡2次,2min/次；

中性樹膠和蓋破片封片。

4.9光學顯微鏡閱片

【檢驗方法的局限性】

1. 免疫組織化學試驗中，試劑選取、樣本固定、處理，切片準備及染色結果解釋等都必須進過嚴格的專業培訓；專業的操作人員、經過認證的實驗室將有助于實驗檢測過程的標準化，從而減少由于外界因素造成的染色偏差。

2. 染色前組織的處理直接影響染色效果。不恰當的固定、冰凍、熔化、清洗、烘干、切片或被其他組織或液體污染都會造成假陽性、抗體定位不準確或假陰性結果。固定和包埋方法的不同或組織內部的不規則也可能造成異常的染色結果。

3. 過度或不足的復染都會影響結果的正確解釋。

4. 該試劑盒僅對10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋的組織進行了驗證，不得用于其它樣本類型或流式細胞檢測等其它用途。

【注意事項】

1. 該試劑盒僅供科研使用。

2. 實驗開始前，應仔細閱讀說明書。

3. 該試劑必須是經過嚴格培訓的專業人員在有效期內使用，如發現漏液、污染或變質，請勿使用。

4. 該試劑使用應采取適當的防護措施，避免試劑同皮膚和眼睛接觸，禁止口吸試劑，若皮膚、粘膜等身體部位接觸該試劑，及時使用大量水沖洗。

5. 抗原修復、孵育時間、溫度條件或應用其他方法均可能導致錯誤結果。

6. 樣本室溫保存時，應在封存7天內染色。否則會因為時間長久，導致組織中抗原退變產生假陰性結果。

7. DAB有潛在致突變作用，在使用過程中應特別注意安全防護措施外，對其使用后的廢液存放和去毒性處理也應符合相關法律法規要求。

8. 該試劑是否應用于非福爾馬林固定組織還未得到證實。

9. 【基本信息】生產企業：賽諾特生物技術（蘇州）有限公司

   【生產日期及使用期限】詳見標簽