BY-0570 P815小鼠肥大細胞瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0570
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/8 14:23:55
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P815小鼠肥大細胞瘤細胞系
P815小鼠肥大細胞瘤細胞系源自 DBA/2 小鼠的自發性肥大細胞瘤，因保留肥大細胞的核心生物學特性 —— 高表達 FcεRI 受體且能釋放炎癥介質，成為研究過敏反應、腫瘤免疫及細胞毒性的經典模型。其du特的雙重屬性 —— 兼具腫瘤細胞的增殖能力與肥大細胞的功能特征，使其在基礎醫學與轉化醫學研究中占據重要地位。
顯微鏡下，P815 細胞以貼壁生長為主，部分呈半懸浮狀態，形態多為多邊形或短梭形，宛如貼附在培養皿上的 “炎癥觸發器”。細胞直徑約 15-20 微米，胞質豐富，內含大量異染性顆粒 —— 這些顆粒是肝素、組胺等炎癥介質的儲存庫，經甲苯胺藍染色后呈紫紅色，清晰可辨。細胞核大而圓，位于細胞中央，核仁明顯，染色質呈細顆粒狀，顯示出活躍的增殖活性。細胞增殖速度較快，倍增時間約 24-36 小時，當融合度達到 70%-80% 時需傳代，傳代時用溫和的吹打即可使部分細胞脫落，剩余貼壁細胞可通過短時yi酶處理分離，按 1:3-1:5 比例接種，連續培養 50 代仍能保持穩定的表型。
培養 P815 細胞需精準調控生長環境。基礎培養基shou選 RPMI 1640，其含有的氨基酸和維生素可滿足細胞代謝需求；添加 10% 熱滅活胎牛血清提供生長因子，其中血清中的干細胞因子（SCF）對維持肥大細胞特性至關重要。培養箱需維持 37℃、5% CO?的恒定環境，pH 值控制在 7.2-7.4 之間，可通過培養基中的酚紅指示劑監測。值得注意的是，該細胞對血清質量敏感，劣質血清會導致顆粒分泌功能下降，因此每批血清需經功能性驗證 —— 即檢測細胞在 IgE 刺激下的組胺釋放率，確保其生物學活性。
P815 細胞的核心價值體現在免疫反應研究領域，其高表達的 FcεRI 受體是 IgE 介導的過敏反應的關鍵分子。當細胞與抗 IgE 抗體或特異性抗原 - IgE 復合物結合后，FcεRI 受體發生交聯，可觸發胞內信號通路（如 Syk 激酶激活），導致顆粒胞吐，釋放組胺、白三烯等炎癥介質。通過檢測組胺釋放量或 β- 己糖胺酶活性（顆粒釋放的替代指標），可量化過敏反應的強度。例如，在研究過敏介質抑制劑時，將不同濃度藥物與細胞共孵育，再用 IgE 刺激，通過對比組胺釋放率，可快速篩選出高效的抗過敏候選化合物。
在腫瘤免疫研究中，P815 細胞是檢測細胞毒性 T 淋巴細胞（CTL）活性的經典靶標。其對 CTL 介導的殺傷高度敏感，通過?1Cr 釋放實驗可精準量化殺傷效率 —— 將標記?1Cr 的 P815 細胞與活化的 CTL 共培養，上清液中?1Cr 的放射活性與殺傷率呈正相關。這一模型廣泛用于研究 CTL 的活化機制，例如，發現 T 細胞受體（TCR）與 P815 細胞表面抗原肽 - MHC 復合物的結合是啟動殺傷的關鍵，而共刺激分子（如 CD80/CD86）的相互作用可增強殺傷效率達 2-3 倍。
在腫瘤生物學研究中，P815 細胞系可用于探索肥大細胞瘤的增殖與轉移機制。其高侵襲性特征 —— 通過 Transwell 實驗可觀察到細胞穿過基底膜的能力較強，與基質金屬蛋白酶（MMP-9）的高表達相關。研究發現，抑制 MMP-9 活性可顯著降低細胞的侵襲能力，這一機制為開發抗肥大細胞瘤轉移藥物提供了靶點。同時，該細胞系對放療敏感，經 γ 射線照射后，細胞凋亡率隨劑量增加而升高，可通過流式細胞術檢測 Annexin V/PI 雙陽性細胞比例，為研究放療誘導的腫瘤細胞死亡機制提供實驗依據。
在疫苗開發領域，P815 細胞可作為腫瘤疫苗的載體細胞。通過基因工程手段將腫瘤相關抗原（如熱休克蛋白）導入細胞，經照射滅活后制成疫苗，接種小鼠可誘導特異性抗腫瘤免疫。實驗顯示，該疫苗可使荷瘤小鼠的腫瘤生長延遲 5-7 天，脾臟中 IFN-γ 分泌型 T 細胞比例增加 2-3 倍，證明其能有效激活細胞免疫應答。
前沿研究中，P815 細胞系的應用持續拓展。在類器官構建中，將其與成纖維細胞共培養，可形成三維腫瘤模型，更真實地模擬體內腫瘤微環境，用于研究肥大細胞瘤與基質細胞的相互作用；在單細胞測序研究中，解析其在 IgE 刺激下的基因表達變化，發現了調控顆粒釋放的新基因，為開發新型抗過敏藥物提供了線索；在基因編輯領域，利用 CRISPR 技術敲除 FcεRI 受體基因，可構建功能缺失模型，深入探究該受體在免疫反應中的非冗余作用。
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