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BY-0216 T-47D人乳腺管癌細胞系

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T-47D人乳腺管癌細胞系

T-47D人乳腺管癌細胞系是探究激素依賴性乳腺管癌的核心模型,憑借高表達雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR),以及對激素調控的高度敏感性,在乳腺管癌的激素作用機制、內分泌治療響應及耐藥研究中占據重要地位,為解析該類型癌癥的發生發展與治療提供了有力的實驗支撐。

來源與背景:該細胞系于 1976 年從一名 54 歲女性乳腺管癌患者的胸腔積液中成功分離建立,隸屬于 luminal 型乳腺癌細胞系。乳腺管癌作為乳腺癌中最常見的類型,約占所有乳腺癌的 70%,其中激素受體陽性的病例占比較高。T-47D 細胞系因完整保留了激素受體信號通路,成為研究激素依賴性乳腺管癌的理想模型。相較于三陰性乳腺癌細胞系(如 MDA-MB-231),它更能精準體現激素依賴的生長特點,尤其適用于研究雌激素在乳腺管癌發生過程中的作用機制,至今仍是該領域內分泌治療研究的關鍵參照。
細胞特性:在形態上,呈現典型的上皮樣特征,貼壁生長且排列緊密,呈鋪路石樣,細胞多為圓形或多邊形,細胞質豐富,細胞核大而圓,核仁清晰可見,核質比約為 1:1.3,具備乳腺管癌細胞的典型形態。其核心特性主要有:高表達激素受體,免疫組化結果顯示,ER 陽性率高達 90%,PR 陽性率達 85%,ERα 蛋白的表達量是正常乳腺上皮細胞的 5-8 倍,對雌激素刺激極為敏感,經 17β- 雌二醇處理后,細胞增殖速率可提升 30%;生長依賴激素,在無血清培養基中,添加雌激素能維持細胞增殖,一旦去除雌激素或加入抗雌激素藥物(如他mo昔芬),細胞生長會受到顯著抑制,其 IC50 值約為 0.5μM;增殖與侵襲能力,體外培養時,倍增時間約為 60-72 小時,克隆形成率約 40%,裸鼠皮下接種成瘤率達 100%,但成瘤速度較慢,6 周時腫瘤體積約為 0.8±0.2 cm3,Transwell 實驗顯示,其穿膜細胞數遠低于 MDA-MB-231,表明其侵襲轉移潛能較低。傳代時,需用常規消化液處理,由于細胞貼壁較牢固,消化時間需 4-5 分鐘,傳代比例為 1:3-1:5,連續傳代 50 次后,仍能保持激素受體的高表達及激素依賴特性。
培養條件:最適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基,并添加 1% 抗菌劑,培養環境需控制在 37℃、5% CO?的飽和濕度條件下。為維持細胞的激素敏感性,可在培養基中加入 10μg/ml 胰島素。細胞密度應維持在 20%-70%,若密度過高,會導致細胞接觸抑制明顯,增殖速率下降 25%。該細胞系對激素環境較為敏感,血清中雌激素水平的波動會影響細胞生長的穩定性。傳代時,需用含血清培養基終止消化,凍存液推薦使用含 10% DMSO 的胎牛血清,復蘇后細胞存活率可達 85% 以上,24 小時貼壁率超過 90%,細胞功能可恢復正常。
檢測鑒定:經過微生物篩查,該細胞系無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染,符合實驗細胞質量標準。免疫細胞化學檢測顯示,ER、PR 呈強陽性,HER2 為陰性,符合 luminal A 型乳腺癌的表型。基因測序證實存在 PIK3CA 基因突變,該突變與約 40% 的 ER 陽性乳腺癌患者情況一致,而 TP53 為野生型。染色體核型分析呈現亞三倍體核型,存在 1 號染色體長臂擴增、8 號染色體三體等異常,與 50% 的乳腺管癌患者遺傳學改變相吻合。功能驗證中,經他mo昔芬處理后,細胞周期 G1 期阻滯率達 60%,充分證實了其對激素治療的敏感性。
應用領域:在激素機制研究中,該細胞系被廣泛用于探究雌激素通過 ER 調控下游靶基因(如 Cyclin D1、c-Myc)的分子機制,為理解 “雌激素 - ER - 靶基因” 通路在乳腺管癌細胞增殖中的作用提供了堅實的實驗依據。在內分泌治療研究方面,常用于評估抗雌激素藥物的療效及耐藥機制,研究發現,長期用他mo昔芬處理可誘導細胞產生耐藥性,耐藥細胞中 ER 共激活因子 SRC-1 的表達上調 2 倍。在藥物研發領域,作為篩選新型 ER 拮抗劑的模型,近期有研究發現,一種新型 ER 降解劑能使 T-47D 細胞的 ER 蛋白水平下降 80%,抑制率明顯高于他mo昔芬。此外,該細胞系還可用于研究激素與其他信號通路的交叉調控,研究表明,與 PI3K 抑制劑聯合使用時,對細胞增殖的抑制率從單獨用藥的 40% 提升至 70%,為聯合治療方案提供了實驗基礎。

與其他乳腺癌細胞系相比,T-47D 的顯著優勢在于其擁有完整的激素受體信號通路,且對內分泌治療敏感,能夠真實模擬激素依賴性乳腺管癌的生物學特性,為該類型癌癥的發病機制研究及內分泌治療策略的開發提供了不可替代的實驗工具,持續推動著乳腺管癌精準診療的發展。

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