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BY-0102 SK-N-SH SKNSH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0102
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/17 12:23:35
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SK-N-SH [SKNSH]人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
SK-N-SH [SKNSH]人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系是研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤的經(jīng)典模型，以兼具神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)分化潛能、表達(dá)多種神經(jīng)標(biāo)志物及穩(wěn)定的增殖特性為顯著特征，在神經(jīng)母細(xì)胞瘤的發(fā)生機(jī)制、細(xì)胞分化及靶向藥物研發(fā)中應(yīng)用廣泛，為解析神經(jīng)母細(xì)胞瘤從原始神經(jīng)嵴細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化到腫瘤進(jìn)展的過(guò)程提供了可靠實(shí)驗(yàn)工具。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系于 1970 年從一名 4 歲女性神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者的骨轉(zhuǎn)移灶中分離建立，屬于未分化型神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系。與原發(fā)灶來(lái)源的細(xì)胞系相比，其保留了神經(jīng)母細(xì)胞瘤的轉(zhuǎn)移特性，尤其適合研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移機(jī)制。作為首ge被發(fā)現(xiàn)具有雙向分化潛能的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系，其長(zhǎng)期傳代后仍能保持這種特性，填bu了神經(jīng)母細(xì)胞瘤分化研究模型的空白，至今仍是神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化研究的重要參照。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)多形性，主要有兩種形態(tài)的細(xì)胞：一種是小型圓形細(xì)胞，類似未分化的神經(jīng)母細(xì)胞；另一種是大型多極細(xì)胞，具有神經(jīng)元樣形態(tài)。細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，部分區(qū)域可形成神經(jīng)突樣結(jié)構(gòu)，細(xì)胞質(zhì)豐富，可見(jiàn)神經(jīng)顆粒，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，核仁明顯，核質(zhì)比約 1:1.2，具有神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的典型形態(tài)特征。核心特性體現(xiàn)為雙向分化潛能，在特定誘導(dǎo)條件下（如加入視huang酸），可向神經(jīng)元方向分化，表達(dá)神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、微管相關(guān)蛋白 2（MAP2）等神經(jīng)元標(biāo)志物；在另一些誘導(dǎo)條件下（如加入佛波酯），可向神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞方向分化，表達(dá)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP），這種特性使其成為研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化調(diào)控機(jī)制的理想模型；神經(jīng)標(biāo)志物表達(dá)，基礎(chǔ)狀態(tài)下即表達(dá)神經(jīng)絲蛋白（NF）、突觸素（Syn）等神經(jīng)標(biāo)志物，其中 NF 的表達(dá)水平是其他神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系的 1.5-2 倍；增殖與侵襲能力，體外培養(yǎng)時(shí)倍增時(shí)間約 48-60 小時(shí)，克隆形成率約 55%，裸鼠皮下接種后 3-4 周可形成腫瘤，成瘤率 100%，Transwell 實(shí)驗(yàn)中穿透基質(zhì)膜的細(xì)胞數(shù)是正常神經(jīng)嵴細(xì)胞的 5-7 倍，具有較強(qiáng)的侵襲能力。傳代時(shí)采用常規(guī)消化液處理，因細(xì)胞貼壁程度不一，消化時(shí)間需控制在 2-4 分鐘，傳代比例 1:3-1:5，連續(xù)傳代 50 次后仍保持雙向分化潛能，但分化效率可能略有下降。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸和 1% 抗菌混合液以維持細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞密度維持在 30%-70% 之間，過(guò)度匯合會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞分化比例升高，未分化細(xì)胞比例下降 15%-20%。與其他腫瘤細(xì)胞系相比，其對(duì)誘導(dǎo)分化劑敏感，培養(yǎng)基中若加入 10μM 視huang酸，72 小時(shí)后即可觀察到神經(jīng)元樣細(xì)胞比例增加（可達(dá) 40% 以上），傳代時(shí)消化后需用含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)，以保護(hù)細(xì)胞表面的分化相關(guān)受體，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復(fù)蘇后存活率可達(dá) 80% 以上，復(fù)蘇后 24 小時(shí)貼壁率超過(guò) 85%。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)微生物篩查，無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及常見(jiàn)病毒污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)顯示，NF、Syn 呈陽(yáng)性表達(dá)，NSE 在誘導(dǎo)后表達(dá)顯著上調(diào)，GFAP 在特定誘導(dǎo)條件下呈陽(yáng)性，符合神經(jīng)母細(xì)胞瘤的分子表型。染色體核型分析呈現(xiàn)亞二倍體核型，存在 1 號(hào)染色體短臂缺失、17 號(hào)染色體三體等異常，與 60% 的神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者的遺傳學(xué)改變吻合。功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)視huang酸處理后，細(xì)胞增殖速率下降 30%，神經(jīng)突長(zhǎng)度增加 2-3 倍，證實(shí)其分化潛能，與臨床神經(jīng)母細(xì)胞瘤在誘導(dǎo)分化治療中的反應(yīng)特征一致。
應(yīng)用領(lǐng)域：在分化機(jī)制研究中，該細(xì)胞系被用于揭示神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，研究發(fā)現(xiàn) MYCN 基因擴(kuò)增是其維持未分化狀態(tài)的關(guān)鍵，沉默 MYCN 可使細(xì)胞自發(fā)向神經(jīng)元方向分化，NSE 表達(dá)上調(diào) 2-3 倍，為理解神經(jīng)母細(xì)胞瘤的分化阻滯機(jī)制提供了重要線索。在藥物篩選方面，是評(píng)估神經(jīng)母細(xì)胞瘤誘導(dǎo)分化藥物的常用模型，通過(guò)檢測(cè)藥物對(duì)其分化比例、增殖速率及凋亡的影響，篩選有效的誘導(dǎo)分化藥物，如視huang酸類藥物可顯著促進(jìn)其分化，且與其他靶向藥物聯(lián)用具有協(xié)同效應(yīng)。在轉(zhuǎn)移機(jī)制研究中，該細(xì)胞系可用于探索神經(jīng)母細(xì)胞瘤的轉(zhuǎn)移途徑，其高表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2、MMP-9），可降解神經(jīng)周?chē)|(zhì)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移，靶向抑制這些酶可顯著降低其侵襲能力，為開(kāi)發(fā)抗轉(zhuǎn)移藥物提供潛在靶點(diǎn)。此外，該細(xì)胞系還可用于研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤與神經(jīng)微環(huán)境的相互作用，其分泌的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子可影響周?chē)窠?jīng)細(xì)胞的功能，同時(shí)周?chē)窠?jīng)細(xì)胞分泌的因子也可促進(jìn)其增殖，這種相互作用為研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤的微環(huán)境依賴性提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
與其他神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系（如 SH-SY5Y）相比，SK-N-SH 的優(yōu)勢(shì)在于其更強(qiáng)的雙向分化潛能，能更全面地模擬神經(jīng)母細(xì)胞瘤在不同分化階段的特征。通過(guò)對(duì)該細(xì)胞系的研究，可為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的 “分化誘導(dǎo)治療” 提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，推動(dòng)神經(jīng)母細(xì)胞瘤治療策略的優(yōu)化。
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