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產(chǎn)品簡介：

內(nèi)毒素(即 lipopolysaccharides，LPS)是 E.coli 細胞壁的主要成分，傳統(tǒng)的去除內(nèi)毒素的方法是將內(nèi)毒素和 DNA 一起純化出來，然后再用各種方法去除其中的內(nèi)毒素，操作繁瑣，DNA 回收率低。本產(chǎn)品可以直接把 E.coli 表面的內(nèi)毒素去除，從根本上避免了內(nèi)毒素對后續(xù)操作（如質粒 DNA 提取，重組蛋白質提取）的污染。

產(chǎn)品特點：

1.首-個在菌體收集階段去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品，從源頭上避免了內(nèi)毒素跟 DNA 和胞漿蛋白的接觸，從根本上防止了可能產(chǎn)生的污染。

2.操作簡單快速，用酶溶液溫和清洗菌體 3-4 次即可去掉細菌表面的內(nèi)毒素，只需要 10 分鐘左右時間，不需要復雜儀器設備。

3.高效，能去除 99%以上的內(nèi)毒素。

4.跟各種質粒 DNA 提取、基因組 DNA 提取和蛋白質提取等操作兼容，DNA 丟失率只有 10%左右（其他方法 DNA 丟失率可以高達 50%）。

5.不影響 DNA 和絕大部分蛋白質的活性，處理過的質粒 DNA 可用于轉染實驗。

6.既可小規(guī)模使用(在 1.5 mL 離心管內(nèi))，也可放量用于大規(guī)模無內(nèi)毒素質粒 DNA 提取和無內(nèi)毒素蛋白質純化。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成 份 規(guī)格包裝

菌體內(nèi)毒素清除劑250 mL250 mL 本色瓶

使用手冊1 份無

保存和運輸

常溫運輸和保存，有效期一年。

自備試劑

無

使用方法：

一：用于菌液小于 3 mL 的樣品

1.收集 1.5-3 mL  E.coli 飽和菌液，12,000 rpm 離心 1 分鐘，棄上清，得到細菌沉淀。

2.加入 1 mL 本產(chǎn)品溫和混勻后 10,000-12,000 rpm 離心 1 分鐘，棄上清（含內(nèi)毒素）。

3.再重復上述操作 3-4 次，得到的菌體可以直接進入后續(xù)的無內(nèi)毒素質粒 DNA 提取或無內(nèi)毒素蛋白質提取程序。

二：用于菌液多于 3 mL 的樣品

整個操作同上，只是在 15 或 50 mL 塑料離心管中進行，離心速度不能超過離心管的

承受力，本產(chǎn)品的用量按比例增加。

背景資料內(nèi)毒素的分子結構

外毒素 vs.內(nèi)毒素

區(qū)別要點外毒素（Exotoxin）內(nèi)毒素（Endotoxin）

存在部位由活的細菌釋放至細菌體

外,為細菌的代謝產(chǎn)物為細菌細胞外壁結構成

份，細胞破裂后釋出

細菌種類以革蘭氏陽性菌多見革蘭氏陰性菌多見

化學特性蛋白質（分子量 27～900 KDa），易被分解破壞，熱不穩(wěn)定（60℃以上能迅速

破壞）磷脂一多糖一蛋白質復合物（毒性主要為類脂A），不易被分解破壞，

耐熱（60℃耐受數(shù)小時）

毒性作用強，微量對實驗動物有致死作用（以 ug 計量）。各種外毒素有選擇作用，引起特殊病變，不引起宿主發(fā)熱反應。抑制蛋白質合成，有細胞毒性、神經(jīng)毒性、紊亂水

鹽代謝等稍弱，對實驗動物致死作用的量比外毒素為大。各種細菌內(nèi)素的毒性作用大致相同。引起發(fā)熱、彌漫性血管內(nèi)凝血、粒細胞減少血癥、

施瓦茲曼現(xiàn)象等

抗原性強，可刺激機體產(chǎn)生高效價的抗毒素。經(jīng)甲醛處理可脫毒成為類毒霉，仍有較強的抗原性，可用于人工自動免

疫弱，刺激機體對多糖成份產(chǎn)生抗體，不形成抗毒素，不能經(jīng)甲醛處理成為類毒素而使毒性消

失

其他幾乎無發(fā)熱性，對腫瘤細胞

無影響很強的發(fā)熱性，破壞腫

瘤細胞

例子白喉毒素，肉毒毒素，破傷風毒素厭氧菌毒素，溶血性

鏈球菌毒素等大腸桿菌，霍亂綠膿菌， 沙門氏菌，赤痢菌等。

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