諾博萊德 高效植物總RNA提取試劑盒（帶gDNA清除柱）

高效植物總 RNA 提取試劑盒FlashPure Plus Plant Total RNA Mini Kit

目錄號：91452

產(chǎn)品內(nèi)容

自備試劑

無水乙醇

保存條件

室溫（15 ~ 25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介

適用于快速提取各種植物根、莖、葉、花的總RNA，gDNA過濾器能高效濾除gDNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE、芯片等。

本試劑盒是同類產(chǎn)品中適應(yīng)性最guang泛，不但可以提取小麥、玉米、水稻、大豆、番茄、煙草、擬南芥等簡單植物，也可以提取茶樹葉片、棉花葉片、葡萄葉片、楊樹葉片、番薯葉片、花生葉片、香蕉葉片、荔枝葉片、白松葉片等多糖多酚含量一般的植物。

如果遇到果實、種子、中草藥，例如：多糖多酚巨高的作物種子（小麥/玉米/大豆/水稻）、葡萄果實、藍(lán)莓果實、百合鱗莖、土豆塊莖；或者次級代謝產(chǎn)物巨豐富的葛根、虎杖、雪蓮等藥用植物，請選擇91513-果實種子總RNA提取試劑盒。

產(chǎn)品特點

1. 無毒：免氯仿、免β-巰基乙醇！

2. 高質(zhì)：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高效：提取全過程僅需 20min！

重要提示：

a. 第一次使用前請先在漂洗液RW中加入指ding量無水乙醇，詳見瓶身的標(biāo)簽。

b. 所有離心步驟均需要在室溫（15 ~25℃）下進行。

操作步驟：

1. 材料處理：

a．在液氮中研磨植物組織成細(xì)粉，取 50 ~ 100 mg 細(xì)粉加入 600 μl裂解液 PAL Plus，立即劇烈渦旋震蕩 30 sec，充分混勻。

b．將裂解物 13,000 rpm 離心 5 ~ 10 min，沉淀不能裂解的碎片。

2. 小心吸取 500 μl 上清轉(zhuǎn)入一個 DNA 清除和 RNA 吸附通用柱（以下簡稱通用柱），13,000 rpm 離心 1 min，DNA 被吸附在膜上，丟棄帶吸附膜的內(nèi)柱，保留濾液（RNA 在濾液中）。

3. 向濾液中加入 0.5 倍體積 (一般 250 μl ) 的無水乙醇，吹打混勻。

4. 轉(zhuǎn)移濾液混合物至一個新的通用柱中（通用柱已放入收集管中），13,000 rpm 離心 1 min，倒棄濾液。此時，RNA 被吸附在膜上。

5. 加入700μl去蛋白液RW1，室溫放置 1min，13,000 rpm 離心 30 sec，倒棄濾液。  

6. 加入 500 μl 漂洗液 RW，13,000 rpm 離心 30 sec，倒棄濾液。

7. 重復(fù)步驟 6。

8. 將通用柱放回空收集管中，13,000 rpm 離心 2 min，除去膜上殘留的乙醇。

9. 取出通用柱的內(nèi)柱，放入 1.5ml RNase-free 離心管中，向吸附膜的中央懸空滴加 30-50μl RNase-free H2O，室溫放置 1 min，13,000 rpm 離心 1 min。

10. 提取的總 RNA，可直接用于下游實驗，或于-70℃保存，以免降解。

相關(guān)產(chǎn)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有 qPCR 儀)

附錄：

一、免液氮直接研磨（自動研磨儀）—— 適用于新鮮樣本

a. 在 2.0 ml 液氮研磨管中放入2粒4 mm 的鋼珠，加入600 μl 裂解液 PAL Plus，放入≤60 mg 樣本，設(shè)置65個頻率，震蕩 2 min。

b. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5 – 10 min，沉淀不能裂解的碎片。

二、液氮研磨（自動研磨儀）—— 適用于各種樣本，尤其是富含糖酚含或

易降解的樣本

a. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3 mm鋼珠3粒，放進≤50 mg 樣本，投入液氮中預(yù)冷。把研磨模塊也丟到液氮中預(yù)冷，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢。

b. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中，放進研磨儀，設(shè)置55個頻率，震蕩 30 - 60 sec。（以北京赫得京 N9548 為例）

c. 研磨完成后，馬上加 500μl 裂解液 PRL 和 50μl 糖分去除劑 PAD，劇烈渦旋 30 sec。

d. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5 - 10 min，沉淀不能裂解的碎片。

 高效植物總RNA提取試劑盒（帶gDNA清除柱）