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糖肽圖譜就是對糖蛋白經過酶解或化學裂解后產生的糖肽進行分離、鑒定和分析,從而獲得糖肽的結構、糖基化位點、糖鏈組成等信息的工具。糖肽是由糖鏈通過共價鍵與dànbáizhì的氨基酸殘基相連形成的生物大分子。糖基化參與調節細胞信號傳導、免疫應答、細胞黏附和癌癥等生物過程。糖肽圖譜使得科學家們能夠在復雜的生物樣品中識別和定量分析糖基化位點及其模式。通過創建糖肽圖譜,研究人員可以研究糖蛋白的功能及其在疾病中的作用。在單克隆抗體等生物藥的研發和生產中,糖肽圖譜可用于分析藥物蛋白的糖基化修飾情況,監測生產過程中糖基化的穩定性和一致性,確保藥物的質量和療效。某些疾病的發生發展與dànbáizhì糖基化異常相關。通過分析患者生物樣本中的糖肽圖譜,可尋找疾病相關的糖基化標志物,用于疾病的早期診斷和病情監測,也有助于研發針對糖基化異常的治療藥物。有助于深入了解糖蛋白的結構與功能關系,揭示糖基化在細胞識別、信號轉導、免疫調節等生物學過程中的作用機制。
一、主要分析方法
1、液相色譜法
(1)原理:利用不同糖肽在固定相和流動相之間分配系數的差異進行分離。反相液相色譜(RP - LC)是常用的方法,基于糖肽的疏水性不同實現分離;親水相互作用液相色譜(HILIC)則根據糖肽與固定相之間的親水相互作用差異進行分離,對極性較強的糖肽分離效果較好。
(2)優勢:能實現糖肽的高效分離,可與質譜等檢測手段聯用,提高分析的準確性和靈敏度。
2、質譜法
(1)原理:將糖肽離子化后,根據其質荷比(m/z)進行檢測和分析。常用的質譜技術包括電噴霧離子化質譜(ESI - MS)和基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI - TOF MS)。通過質譜圖可以獲得糖肽的分子量信息,進一步的串聯質譜(MS/MS)分析還能提供糖肽的氨基酸序列和糖鏈結構信息。
(2)優勢:具有高靈敏度、高分辨率和快速分析的特點,能夠準確測定糖肽的分子量和結構。
3、毛細管電泳法
(1)原理:基于糖肽在電場作用下的遷移率差異進行分離。糖肽的電荷、大小和形狀等因素決定其在毛細管中的遷移速度,從而實現分離。
(2)優勢:分離效率高、樣品用量少、分析速度快,適用于分析復雜樣品中的糖肽。
二、實驗流程
1、樣品制備
從生物樣本中提取糖蛋白,經過純化后,采用蛋白酶(如yídànbáiméi)進行酶解,將糖蛋白切割成大小合適的糖肽片段。
2、分離分析
將酶解后的糖肽樣品注入液相色譜、質譜或毛細管電泳等分析儀器中進行分離和檢測。在液相色譜 - 質譜聯用(LC - MS)分析中,先通過液相色譜將糖肽分離,然后進入質譜進行檢測;在毛細管電泳 - 質譜聯用(CE - MS)中,先經毛細管電泳分離,再進入質譜分析。
3、數據處理與解析
分析儀器產生的數據通過專門的軟件進行處理和分析,如通過質譜數據確定糖肽的質荷比、分子量等信息,與數據庫比對,確定糖肽的氨基酸序列、糖基化位點和糖鏈結構等。
百泰派克生物科技在糖肽圖譜分析領域具備豐富的經驗和技術優勢。我們的服務涵蓋樣品制備、糖肽富集、質譜分析及數據解析各個環節,致力于為客戶提供高質量的糖肽圖譜分析服務。通過與我們合作,客戶可以獲得zhuānyè的技術支持和詳細的分析報告,助力其科研項目的成功實施。無論是基礎研究還是應用開發,百泰派克生物科技都將是您可靠的合作伙伴。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上*的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術*,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
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3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
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