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教你如何選擇合適的液相色譜柱

閱讀:6725        發(fā)布時(shí)間:2019-2-22
   液相色譜柱,是一種用于液體色譜分析儀器的部件。那么我們該如何的去選擇液相色譜柱呢?下面我們就一起來看看吧。

  在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等,液相色譜柱決定終分離效果,所以在選擇色譜柱時(shí)候有必要考慮清楚自己的需求。

  首先液相色譜柱目前來說分為正反相色譜柱,正相有SI等,反相有C18等。正相主要分離極性物質(zhì),反相主要分離非極性物質(zhì),氨基柱等主要分離二者之間的。

  明確了色譜柱大概功能之后,確認(rèn)下自己樣品信息,基本就有點(diǎn)眉目了,方向?qū)α耍O碌氖虑榫褪羌?xì)節(jié)了如:鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等

  1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱

  2. 如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對試劑平衡時(shí)間長,對流動相pH要求比較精密,否 則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))

  3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留

  4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡單,缺點(diǎn)是目前實(shí) 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn) 是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱

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