Mach1-T1菌株由野生型non-K-12 E. Coli W菌株改造而來，是目前生長速度較快的感受態(tài)細胞之一，在平板上9h可見克隆，缺失核酸內切酶 (endA)，提高了質粒DNA的產量和質量；重組酶缺陷型 (recA1398)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩(wěn)定性；lacZ M15的存在使Mach1-T1可用于藍、白斑篩選；tonA突變賦予Mach1-T1菌株對噬菌體T1和T5的抗性。Mach1-T1感受態(tài)細胞經特殊工藝制作，pUC19質粒檢測轉化效率>5x108 cfu/μg DNA。
注意事項：
1、感受態(tài)細胞建議在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2、混入目的DNA時應輕柔操作。
3、轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
操作說明：
1.Mach1-T1感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，待菌塊融化，加入目的 DNA（質粒或連接產物）并用手打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置 25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養(yǎng)基，混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃至少至少13h。
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