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游離脂肪酸(NEFA)ELISA試劑盒

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  • 游離脂肪酸(NEFA)ELISA試劑盒

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參考價 2500
訂貨量 1
具體成交價以合同協議為準
  • 型號 DB1656-QT
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 上海市

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更新時間:2024-09-26 10:43:46瀏覽次數:542

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產品簡介

供貨周期 一個月 規格 96T
貨號 DB1656-QT 主要用途 僅供科研
本試劑盒用于測定樣本中游離脂肪酸(NEFA)的含量。

詳細介紹

本試劑盒應用酶聯免疫競爭法測定標本中游離脂肪酸(NEFA)水平。用純化的游離脂肪酸(NEFA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入游離脂肪酸(NEFA),和HRP標記的游離脂肪酸(NEFA)抗原,使它們競爭結合,,經過洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的游離脂肪酸(NEFA)的含量呈負相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中游離脂肪酸(NEFA)的含量。  

標本要求

1.標本處理:(1)水樣   采集后經 -20℃反復凍融三次,再經玻璃纖維過濾后,備查

(2)組織   樣品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相關文獻提取進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,備查

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 加樣:分別設標準孔、空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上標準孔中加50微升,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

2. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。  

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

7. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

8. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。




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