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技術文章

ELISA試劑盒為何“罷工“?六大變質原因深度剖析

閱讀:227          發布時間:2025-5-27

一、方法學缺陷:競爭抑制法成重災區

操作時差效應:競爭抑制法(HBeAb/HBcAb檢測常用)易因加樣時間差異導致不-公平競爭,重復性差

質量控制難點:相較于雙抗體夾心法等,該模式對溫育時間敏感度更高

 

二、試劑因素:批間差異與保存條件

生產波動:不同批次間活性成分濃度存在天然差異,建議選擇長批號試劑

儲存不當:2-8℃避光保存為基本要求,反復凍融會破壞酶標記物活性(尤其HRP標記抗體)

分裝技巧:使用率低的試劑應分裝保存,避免整盒反復凍融

 

三、樣本污染:隱形殺手清單

干擾類型具體表現內源性類風濕因子、補體、異嗜性抗體等造成假陽性外源性溶血、細菌污染、反復凍融標本導致蛋白降解

 

四、操作失誤:細節決定成敗

加樣誤差:未更換吸頭導致交叉污染

溫育失控:溫度波動超過±1℃顯著影響抗原抗體結合

洗滌不徹-底:殘留物質干擾顯色反應

 

五、環境因素:容易被忽視的威脅

光照破壞:底物B對光敏感,需避光操作

化學污染:實驗臺面消毒劑殘留可能抑制酶活性

揮發損失:開蓋時間過長導致液體試劑濃度改變

 

六、過期失效:時間成本不可逆

活性衰減:超過有效期后抗體效價急劇下降

標準品失效:稀釋后的標準品禁止二次使用

 

實用解決方案

采用真空采血管避免溶血

每板設置復孔提高數據可靠性

建立試劑驗收記錄表追蹤批號性能

溫馨提示:定期校準移液器,建議每季度進行1次重力校準(特別是微量移液器)

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