詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 17號染色體開放閱讀框74抗體 |
英文名稱 | C17orf74 |
規格 | 0.2ml |
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公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
天狼猩紅 NDesmethyl Topotecan 質量規格:美國進口非凍型拭子DNA保存液(B型)
詹納斯綠 B Topotecan Carboxylic Acid Sodium Salt 質量規格:美國進口非凍型血液DNA保存液(100 mL)
印度墨水 Topotecan 質量規格:美國進口非凍型血液DNA保存液(250 mL)
蘇丹 B 15keto Flupros isopropyl ester 質量規格:美國進口非凍型組織DNA保存液(100 mL)
臺盼藍 Trazodoned6 Hydrochloride 質量規格:美國進口紅細胞裂解液A型(核純化)
藍 O Trazodone xide 質量規格:美國進口紅細胞裂解液B型(流式細胞分析用)
羅丹明 123 4'Hydroxy Trazodone HCl 質量規格:美國進口菌體內毒素清除劑
性品紅 Varenicline Hydrochloride Labeled 15N3 質量規格:美國進口土壤腐殖清除劑
異氰熒光素 (常... Varenicline Lactam 質量規格:美國進口一步離心式石蠟清除劑
異氰熒光素 (超... Hydroxy Varenicline 質量規格:美國進口動物DNA提取
曙紅 Y (二鈉鹽) NFormyl Varenicline 質量規格:美國進口96孔板血液DNAout(真空法)(見關聯產品)
溴藍 (常規) Varenicline NGlucoside 質量規格:美國進口96孔板血液DNAout(離心法)(1次)
溴藍 (超純級) Varenicline Carbamoyl βDGlucuronide 質量規格:美國進口96孔板血液DNAout(離心法)(5次)
吖橙 Deacetyl Virelbine 質量規格:美國進口FTA血片DNAout(見關聯產品)
3,3',5,5'四聯... Virelbine ditartrate salt hydrate 質量規格:美國進口Southern級動物DNAout
二青 FF entVoriconazole 質量規格:美國進口Southern級血液DNAout(見關聯產品)
3,3',5,5'四聯... DLLevothyroxine sodium 質量規格:美國進口百萬基級動物DNAout(見關聯產品)
17號染色體開放閱讀框74抗體100mg麥康凱瓊脂7681-93-858-86-696T微管關聯蛋白2(MAP2)HPLC≥99%腸脂肪結合蛋白檢測試劑盒20mgHPD 3094-09-5化學試劑N-α-酰轉移酶15(NαA15)350mg牛肉膏蛋白胨肉湯7681-93-8636-61-396T色素瘤關聯ME20(ME20M)HPLC≥90%腸三葉子檢測試劑盒20mgCOPS210605-21-7化學試劑N-α-酰轉移酶50(NαA50)
350mg牛肉膏蛋白胨肉湯7681-93-8636-61-396T色素瘤關聯ME20(ME20M)HPLC≥90%腸三葉子檢測試劑盒20mgCOPS210605-21-7化學試劑N-α-酰轉移酶50(NαA50)200mg牛肉膏蛋白胨瓊脂723-46-650-99-796T套膜蛋白(iNV)HPLC≥98%腸道病毒71型檢測試劑盒100mgCOPS2 Ab10605-21-7化學試劑鎂離子轉運蛋白1(MAGT1)
200mg牛肉膏蛋白胨瓊脂723-46-650-99-796T套膜蛋白(iNV)HPLC≥98%腸道病毒71型檢測試劑盒100mgCOPS2 Ab10605-21-7化學試劑鎂離子轉運蛋白1(MAGT1)200mg麥康凱瓊脂723-46-6203191-10-096T鳥脫羧酶(ODC)HPLC≥98%層粘連蛋白亞γ-2檢測試劑盒20mgCCL110605-21-7化學試劑Kindlin 3蛋白(KIND3)
200mg麥康凱瓊脂723-46-6203191-10-096T鳥脫羧酶(ODC)HPLC≥98%層粘連蛋白亞γ-2檢測試劑盒20mgCCL110605-21-7化學試劑Kindlin 3蛋白(KIND3)200mg麥芽汁瓊脂723-46-6461432-26-896T粘著斑激酶(FAK)HPLC≥98%層粘連蛋白β1檢測試劑盒20mgRIG-I23564-05-8化學試劑Kindlin 1蛋白(KIND1)
200mg麥芽汁瓊脂723-46-6461432-26-896T粘著斑激酶(FAK)HPLC≥98%層粘連蛋白β1檢測試劑盒20mgRIG-I23564-05-8化學試劑Kindlin 1蛋白(KIND1)25mg麥芽汁肉湯25316-40-9199796-52-696T微管關聯蛋白6(MAP6)HPLC≥98%層粘連蛋白-5檢測試劑盒20mgCoxV-B323564-05-8化學試劑Sentan蛋白(SNTN)