詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 卷曲螺旋結構域蛋白38抗體 |
英文名稱 | CCDC38 |
規格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
大鼠肺泡巨噬細胞英文名稱:NR8383
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞)5×106cells/瓶×2
結晶紫染色液規格:100ml
大鼠胰島素細胞英文名稱:INS-1
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
PC-3(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠牙細胞*培養基100mL
人胰腺氟尿嘧啶耐藥英文名稱:PATU-8988/FU
人肝實質細胞*培養基100mL
中國藍糖瓊脂/中國藍瓊脂/China Blue Lactose Agar弱選擇性培養基,腸道致病菌選擇分離250克國產/進口
CAL-27(人舌鱗細胞)5×106cells/瓶×2
5-8F, 人高轉移鼻咽細胞系
OGY瓊脂/土霉素葡萄糖酵母粉瓊脂基礎/OGY Agar霉菌、酵母菌分離培養和計數250克國產/進口
突觸囊泡蛋白Ⅺ(SYT11)ELISA Kit for Synaptotagmin XI (SYT11)規格:48T/96T
視黃醇脫酶5(RDH5)ELISA Kit for Retil Dehydrogenase 5 (RDH5)規格:48T/96T
甘-N-酰基轉移酶(GLYAT)ELISA Kit for Glycine-N-Acyltransferase (GLYAT)規格:48T/96T
糖磺基轉移酶14(CHST14)ELISA Kit for Carbohydrate Sulfotransferase 14 (CHST14)規格:48T/96T
生長分化因子5(GDF5)ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5)規格:48T/96T
70kDa熱休克蛋白1B(HSPA1B)ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1B (HSPA1B)規格:48T/96T
耳蝶呤1(O*)ELISA Kit for Otopetrin 1 (O*)規格:48T/96T
酰肽酶1(METAP1)ELISA Kit for Methionyl Amipeptidase 1 (METAP1)規格:48T/96T
神經酰激酶(CERK)ELISA Kit for Ceramide Kinase (CERK)規格:48T/96T
肌肽合酶1(CARNS1)ELISA Kit for Carsine Synthase 1 (CARNS1)規格:48T/96T
補體成分5a受體1(C5aR1)ELISA Kit for Complement Component 5a Receptor 1 (C5aR1)規格:48T/96T
β-乳球蛋白(βLg)ELISA Kit for Beta-Lactoglobulin (bLg)規格:48T/96T
卷曲螺旋結構域蛋白38抗體200mg發酵專超細玉米3810-74-0261767-91-396T胰島素自身抗體(IAA)HPLC≥98%蛋白二化物異構酶A3檢測試劑盒5mgNtn12702-72-9化學試劑冠蛋白2A(CORO2A)200mg發酵專豆油1404-93-968027-14-596T胰多肽(PP)HPLC≥98%蛋白S檢測試劑盒5mgRUNX268157-60-8化學試劑冠蛋白2B(CORO2B)
200mg發油1404-93-968027-14-596T胰多肽(PP)HPLC≥98%蛋白S檢測試劑盒5mgRUNX268157-60-8化學試劑冠蛋白2B(CORO2B)50mg發酵棉油1404-93-93934-84-796T胰高血糖素(GC)HPLC≥98%蛋白C檢測試劑盒20mgTGF-α68157-60-8化學試劑Citron蛋白(CIT)
50mg油1404-93-93934-84-796T胰高血糖素(GC)HPLC≥98%蛋白C檢測試劑盒20mgTGF-α68157-60-8化學試劑Citron蛋白(CIT)50mg發米油1404-93-9143202-36-296T激肽原1(KNG1)HPLC≥98%蛋白ATP1B4檢測試劑盒20mgTGF-β68157-60-8化學試劑膽脫酶(CHDH)
50mg發酵米油1404-93-9143202-36-296T激肽原1(KNG1)HPLC≥98%蛋白ATP1B4檢測試劑盒20mgTGF-β68157-60-8化學試劑膽脫酶(CHDH)500mg發小麥胚芽22189-32-896T胱天蛋白酶13(CASP13)HPLC≥98%蛋白檢測試劑盒20mgTGF-β168157-60-8化學試劑幾質酶1(CHIT1)
500mg發麥胚芽22189-32-896T胱天蛋白酶13(CASP13)HPLC≥98%蛋白檢測試劑盒20mgTGF-β168157-60-8化學試劑幾質酶1(CHIT1)250mg麩皮22189-32-81352001-09-296T孕受體(PGR)HPLC≥98%蛋白 DJ-1檢測試劑盒5mgTGF-β211024-24-1化學試劑性幾質酶(CHIA)