詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 蛇毒巴曲酶抗體 |
英文名稱 | Batroxobin Protein |
規格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
去基羅昔康(羅昔康雜質B) 質量規格:美國進口純度:≥98%
基4-羥基-2-基-2H-1,2-并噻嗪-3-羧鹽 1,1-二氧物 質量規格:美國進口純度:≥98%
異基4-羥基-2H-1,2-并噻嗪-3-羧鹽 1,1-二氧物 (羅昔康雜質I) 質量規格:美國進口純度:≥98%
基4-羥基-2-基-2H-1,2-并噻嗪-3-羧鹽 1,1-二氧物(羅昔康雜質 K) 質量規格:美國進口純度:≥97%
異基 4-羥基-2-基-2H-1,2-并噻嗪-3-羧鹽 1,1-二氧物 (羅昔康雜質 L) 質量規格:美國進口純度:≥98%
沙卡林N-(2-醋異基酯)(羅昔康雜質 F) 質量規格:美國進口純度:0.95
羅昔康-d3 質量規格:美國進口純度:0.95
泊沙康唑-d4 質量規格:美國進口純度:≥98%
利福昔明標記d6 質量規格:美國進口純度:≥98%
羅匹尼羅N-氧物 質量規格:美國進口純度:≥98%
3-氧羅匹尼羅鹽鹽 質量規格:美國進口純度:≥98%
羅卡因-d7 質量規格:美國進口純度:≥98%
羅卡因鹽鹽-d7 質量規格:美國進口純度:≥98%
羅舒伐他汀內酯 質量規格:美國進口純度:≥98%
(3R,5R)-羅舒伐他汀 質量規格:美國進口純度:≥98%
羅舒伐他汀酰基-β-D-葡萄糖苷 質量規格:美國進口純度:≥98%
蛇毒巴曲酶抗體Roseovarius mucosus分離基物: 沉積物/土黃色沉積物上覆水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 1、海洋石油污染生物修復; 2、生物活性物質篩選。培養基: 821生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Micromonospora sp.分離基物: 海灘土提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 活性物質;具有抑制彈性蛋白酶的活性培養基: CM0012生長條件: 35-37C存儲條件: 真空冷凍干燥
Escherichia coli分離基物: 病料提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 研究培養基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Marinobacter vinifirmus分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no應用領域: 1.烷烴及芳烴類降解菌,可用于生物修復;2.可用于生物催化;3.可用于篩選生物活性物質;4.可用于海洋微生物生態學研究。培養基: 745生長條件: 18-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Aspergillus sp.提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 抗癌活性培養基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Aspergillus oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: CM0015生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Nitratireductor kimnyeongensis分離基物: 水樣/多管上覆水提供形式: 凍干物模式菌株: no應用領域: 無機污染物抗性菌/二價Ni抗性菌培養基: 475生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Bacillus sphaericus Meyer and Neide分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 141生長條件: 30存儲條件: 定期移植法
Streptomyces rimosus提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產生Terramycin土霉素培養基: CM0039生長條件: 36C存儲條件: 真空冷凍干燥