供貨周期 | 一周 | 規格 | 10次/20次 |
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貨號 | G&VS10192.1 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
主要用途:細胞APC蛋白表達流式細胞儀技術試劑盒是一種旨在從動物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養細胞的線粒體的制備。其制備物產量高,可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學和病理生理學等的研究。產品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩定,分離產量和純度堪稱同類產品*。
細胞APC蛋白表達流式細胞儀技術試劑盒注意事項
- 本產品為10次(1克動物組織或5 X 107細胞)或50次(200毫克動物組織或1 X 107細胞)操作
- 實際操作的動物組織重量或細胞量與試劑使用量按比例調整:例如200毫克動物組織:試劑用量是標準用量的五分之一
- 所有操作均須嚴格在4℃或以下狀態進行
- 操作時,須戴手套
- 操作時,須無菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(Reagent B)和保存液(Reagent E)
- 建議使用足夠的樣品量
- 建議嚴格控制操作時間
- 通常勻化次數為20至40下(或細胞顆粒群/組織塊狀消失為止)達到80%的細胞裂解為理想狀態,但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細胞裂解程度:完整細胞呈現發亮的圓環。低于50%可以增加勻化次數
- 通常孵育5分鐘(不宜超過5分鐘)達到80%的細胞裂解為理想狀態,但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細胞裂解程度:完整細胞呈現發亮的圓環。低于50%可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數
- 對于難以裂解的細胞,例如HeLa細胞,采用物理勻漿法是優先*的技術處理
- 通常1克動物組織或5 X 107細胞的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白
12. 如果需要計量線粒體,稀釋后數分鐘內完成,否則線粒體將分解
13. 本產品所獲得的線粒體純度和產量zui為理想。通過調整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線粒體純化程度,但線粒體產量相應減少
14. 如果需要獲得99%以上純度的線粒體,使用動物細胞/組織高質純化線粒體分離試劑盒-GMS10006.3
- 線粒體正常活性測定方法是: CITRATE SYNTHASE活性、氧化磷酸化、細胞色素吸收峰譜等
- 線粒體內外膜完整測定方法是:CYTOCHROME C OXIDASE活性和熒光JC染色
- 本公司提供線粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等
- 本公司提供系列線粒體分析試劑產品
質量標準
- 本產品經鑒定性能穩定
- 本產品經鑒定分離的線粒體內外膜完整
- 本產品經鑒定分離的線粒體維持正常活性
- 本產品經鑒定不含污染性蛋白酶和核酶
保存方式
保存凈化液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月
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