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液相色譜儀(HPLC)檢測飼料中L-肉堿方案

來源:蘇州市萊頓科學儀器有限公司   2014年02月24日 13:59  

液相色譜儀(HPLC)檢測飼料中L-肉堿方案

旋肉堿L-肉堿)又稱肉毒堿,是一種水溶性氨基酸,由賴氨酸衍生而來。分子結構為L-γ-*胺β-羥丁酸,分子式為C7H16NO3,分子量為161.2。它是B族維生素類似物,曾被稱為維生素BT。其分子結構中含有一個可供脂肪酸脂化的羥基,其飽和鍵和極性官能團有良好的水溶性和吸濕性,200℃以上它仍穩定存在,可在PH3~6的溶液中放置一年以上而不變壞。1998年我國衛生部將L-肉堿批準為食品添加劑,列入營養強化劑類。

  萊頓公司推薦液相色譜儀-檢測飼料中L-肉堿的含量,得出的結果準確可靠,供廣大用戶參考。

  以下是飼料中L-肉堿的詳細檢測方法。

1  儀器與試劑

1.1 儀器
  液相色譜儀
  液相色譜柱 C18  250mm×4.6mm×5μm
  實驗室常用儀器設備
  超聲波水浴
  分析天平(感量0.001g
  0.45μm水性濾膜

1.2 試劑  
  異丙醇,色譜純。
  甲醇,色譜純。
  乙腈,色譜純。
  磷酸氫二鈉。
  磷酸二氫鉀。
  三乙醇胺。
  檸檬酸。
  氧化銀。
  肉堿衍生劑。

2  測定原理
  樣品經加乙醇超聲提取后,然后加入肉堿衍生劑,將衍生物注入液相色譜反相柱上進行分離,用紫外檢測器在210nm波長處定量測定。

3  試樣溶液的制備
  稱取5g試樣于100ml燒杯中,加入30ml無水乙醇,溶解并轉移至100ml容量瓶中,先后用10ml無水乙醇分3次洗滌燒杯,樣液轉移至100ml容量瓶中,超聲提取10min后用無水乙醇定容至刻度,混勻后于4000r/min離心5min。取上清液2ml,加入肉堿衍生劑0.25ml(衍生劑配制方法:40 mg P-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈,加入40% 氫氧化四丁基銨50 µl),混合后置于60℃恒溫水溫箱120 min,吸取20 µl進樣分析。

4  色譜條件
  色譜柱:C18柱 250mm×4.6mm×5μm
  流動相:甲醇:磷酸鹽=5:95
  流速:1.0mL/min
  溫度:室溫;
  進樣量:20μL
  檢測波長:210nm

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蘇州市萊頓科學儀器有限公司

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