熒光分光光度計基本原理
由高壓汞燈或氙燈發出的紫外光和藍紫光經濾光片照射到樣品池中,激發樣品中的熒光物質發出熒光,熒光經過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數字的形式顯示出來。 物質熒光的產生是由在通常狀況下處于基態的物質分子吸收激發光后變為激發態, 這些處于激發態的分子是不穩定的,在返回基態的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產生熒光.
不同物質由于分子結構的不同,其激發態能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現為各種物質都有其特征熒光激發和發射光譜;,因此可以用熒光激發和發射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。
在溶液中,當熒光物質的濃度較低時,其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關系,即IF=KC,利用這種關系可以進行熒光物質的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,熒光分析通常也采用標準曲線法進行。
熒光分光光度計的功能
1、波長掃描
波長掃描功能主要包括熒光強度和發光強度兩種數據模式。通過熒光強度數據模式可以得到樣品的激發光譜和熒光光譜,是一種比較常用的方法。
2、時間掃描
時間掃描是在規定的時間間隔內采集被測樣品的熒光強度隨時間變化曲線。可以用來監測被測樣品的物理化學變化,動力學法可被執行。
3、光度值法
使用波長法進行定量,高達20個標準樣品能被測量,通過標準濃度的每個點來繪制多邊形標準曲線,回歸標準曲線的制備可使用一次、二次、三次方的曲線或折線,同時可獲得其相關系數R及R2。
4、三維掃描
可以得到三維圖、等高線圖,快速進行未知樣品熒光峰位的測定。
5、強大的圖譜處理功能
兩個譜圖可進行加、減、乘、除運算,也可以計算譜圖面積;具有光譜校正和快門控制等。
熒光分光光度計的技術參數
1.光源: 150W 氙燈
2.波長范圍: 200 nm-900nm
3.靈敏度:S/N>500(峰對峰)
4.光柵: 1200grooves/250 nm blazing
5.波長掃描速度: zui大5000 nm/min
6.波長驅動器速度: 10,000 nm/min
7.波長度:+ 2 nm
8.波長重復性:+ 2 nm
9.狹縫寬度: 1,2,5,10,20 nm
10.尺寸: 518mm(W)×604mm(D)×272mm(H)
11.重量: 43.7kg
12.電源: 100~132V 50/60 Hz或者180~240V 50/60 Hz(可選)
熒光分光光度計的應用
1.醫學和臨床檢驗———生物體試料的臨床分析
2.藥學和藥理學———天然藥物分析,藥品質量控制和藥物代謝的研究
3.生物化學———對于生物體內微量物質的測定
4.食品工業———食品中痕量組分的測定
5.污染物的分析———大氣污染、環境衛生檢測,食品污染物研究等
6.有機和無機化學———用吸光光度法不能測定的痕量組分分析
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