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豬細胞色素P450亞酶51(CYP51)試劑盒使用說明書

來源:上海將來實業股份有限公司   2013年03月04日 15:37  

 

豬細胞色素P450亞酶51(CYP51)酶聯免疫分析(ELISA
試劑盒使用說明書

 

實驗原理:
 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬細胞色素P450亞酶51(CYP51)水平。用純化的豬細胞色素P450亞酶51(CYP51)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細胞色素P450亞酶51(CYP51)再與HRP標記的細胞色素P450亞酶51(CYP51)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞色素P450亞酶51(CYP51)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬細胞色素P450亞酶51(CYP51)活性濃度。

試劑盒組成

elisa試劑盒組成
48孔配置
96孔配置
保存
說明書
1份
1份
 
封板膜
2片(48)
2片(96)
 
密封袋
1個
1個
 
酶標包被板
1×48
1×96
2-8保存
標準品:180IU/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8保存
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8保存
酶標試劑
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
樣品稀釋液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
顯色劑A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
顯色劑B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
終止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8保存
濃縮洗滌液
(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶
2-8保存

注意事項:

1. elisa試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

計算:

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,   
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD     
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋      
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標      
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      
倍數,即為樣品的實際濃度。                  
 
         (此圖僅供參考)

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