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(PHA)植物血凝素的制備方法

來源:北京雅安達生物技術有限公司   2013年01月08日 15:16  

植物血凝素也稱為植物凝集素(PHA),可自制也可購自商品。自制的方法常用生理鹽水提取法。
  (A)干品制備法(1)選廣東雞子豆10g,用蒸餾水沖洗,置培養皿內用75%酒精一次性浸洗,倒掉酒精留間隙置37℃。恒溫箱內24-48小時;(2)在無菌條件下研碎雞子豆,加生理鹽水30ml,搖勻后放入4℃冰箱24小時,第二天再加生理鹽水70ml,再置4℃冰箱內24小時。每8-12小時搖蕩一次。(也可一次性加100ml生理鹽水);(3)無菌條件下移入10-50ml離心管內,3000-4000rpm30分鐘。在無菌箱內把上清液分裝于10ml小瓶,置冰箱冷凍層備用;(4)效價:外周血染色體制備每100ml培養基加PHA約2ml。注:若整個過程未在無菌條件下進行,分裝時用G5玻砂漏斗除菌即可。
  (B)鮮品制備法:(1)選擇完整無破皮鮮菜豆20g,用75%酒精浸泡10分鐘;(2)在凈化工作中用無菌鹽水或蒸餾水漂洗二次,然后置無菌乳缽中搗成糊狀,用100ml無菌鹽水浸泡封口;(3)移入4℃冰箱中置24小時,中間搖動數次,次日3000rpm30分鐘,在無菌情況下分裝上清液于10ml小瓶內,置冰箱冷凍層備用。(4)效價:正式使用前先用一定量作效價測定,按效

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