一、菌種簡介

副溶血弧菌(Fujino et al. 1951) Sakazaki et al. 1963是革蘭氏陰性的菌棒狀、弧狀、卵圓狀無芽孢菌，屬于弧菌屬，是一種常見的病原菌。是一種嗜鹽性的革蘭氏陰性菌，可以發酵葡萄糖，不產氣，不能利用蔗糖和乳糖，不產生硫化氫，氧化酶試驗呈現陽性，賴氨酸脫縮酶和鳥氨酸脫縮酶試驗呈現陽性，二精氨酸脫縮酶試驗呈現陰性。其主要的棲息地在海水中。如果食用了遭此菌污染的海鮮，會引發食物中毒。

二、基本信息

別名：嗜鹽菌，副溶血弧菌，副溶血性弧菌

中文學名：腸炎弧菌

拉丁學名：Vibrio Parahaemolyticus

二名法：Vibrio parahaemolyticus

界：細菌界

門：變形菌門 Proteobacteria

綱：γ-變形菌綱Gammaproteobacteria

目：弧菌目 Vibrionales

科：弧菌科 Vibrionaceae

屬：弧菌屬 Vibrio

種：副溶血弧菌 V. parahaemolyticus

簡稱：VP

三、生存環境

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)廣泛存在于海水和海產品中,是我國沿海地區常見的食物中毒病原菌。副溶血弧菌嗜鹽畏酸，在無鹽培養基上，不能生長，3%～6%食鹽水繁殖迅速，每8～9分鐘為1周期，低于0.5%或高于8%鹽水中停止生長。在食醋中1～3分鐘即死亡，加熱56℃5～10分鐘滅活，在1%鹽酸中5分鐘死亡。

四、菌株性質

已知副溶血弧菌有12種O抗原及59種K抗原，據其發酵糖類的情況可分為5個類型。各種弧菌對人和動物均有較強的毒力，其致病物質主要有分子量42000的致熱性溶血素(TDH)和分子量48000的TDH類似溶血毒(TRH)，具有溶血活性、腸毒素和致死作用。

副溶血性弧菌食物中毒也稱嗜鹽菌食物中毒，是進食含有該菌的食物所致，主要來自海產品或鹽腌漬品，常見者為蟹類、烏賊、海蜇、魚、黃泥螺等，其次為蛋品、肉類或蔬菜。臨床上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要癥狀。主要病理變化為空腸及回腸有輕度糜爛，胃粘膜炎、內臟(肝、脾、肺)淤血等。

五、檢測方法

1、溶血性試驗

用高鹽血瓊脂培養基，在限定的條件下培養副溶血性弧菌時出現的溶血反應，稱此溶血性能為“神奈川現象”。

此試驗要求是用人或兔的新鮮紅血球制備高鹽血平板，經37℃、24h培養，如在單個菌落周圍呈現透明溶血環或在菌落下面有明顯溶血者，為“神奈川現象”陽性，若不出現透明溶血環或無明顯溶血者，為“神奈川現象”陰性。有致病性的副溶血性弧菌，多數為神奈川現象陽性，但亦有少數為陰性。

2、血清學試驗

副溶血性弧菌有三種抗原，即O抗原（菌體抗原），K抗原（莢膜抗原）及H抗原（鞭毛抗原），其中血清學分類上有意義的是前兩者：O抗原有13種血清群，K抗原有65種血清型。

進行副溶血性弧菌血清學鑒定時，可用O抗原分群，將18-24h的培養物，用3%食鹽水作成較濃的菌懸液，121℃高壓1h或100℃煮沸后，用此菌懸液進行O抗血清玻片凝集試驗，同時用無菌生理鹽水作對照，如O凝集反應陽性時，可用不經加熱的菌懸液進行K抗血清玻片凝集反應分型判定。天津生物芯片公司的診斷血清產品覆蓋了該菌所有的O血清群及K血清型。

3、核酸擴增試驗

所有副溶血弧菌分離株都含有不耐熱溶血毒素（TLH），這種溶血素是副溶血弧菌所的，因此它的編碼基因tlh基因常被用作檢測副溶血弧菌的靶基因。而tlh并不是一個毒素基因，真正與致病相關的是副溶血弧菌的耐熱直接溶血素（TDH）和溶血相關溶血素（TRH），因此它們的編碼基因tdh、tlh基因常被用作副溶血弧菌致病性檢測的特異基因。基于此，天津生物芯片推出一系列常規PCR試劑盒及熒光PCR試劑盒。

1）常規PCR：鑒定標準是通過電泳來判斷是否有擴增的核酸片段以及擴增產物的大小是否正確。

2）實時熒光PCR：通過對實時熒光PCR反應的每一個循環產物進行熒光信號的實時監測來判斷分析。

4、嗜鹽性試驗

目的：副溶血弧菌具有嗜鹽性，此試驗為探究它宜生長的鹽濃度。

（1）配置胰蛋白胨水50mL，分裝到5支試管，每支試管都是9mL（配多5毫升只是怕實驗過程有損耗）

（2）在5支試管按量分別加入0%，3%，6%，8%，10%的NaCl

（3）在純培養的3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂中挑取單個可疑菌落分別介入上述的5支試管中

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