核因子E2相關因子（Nrf2）是一種轉錄因子，通過結合其啟動子區域的ARE（抗氧化反應元件）來增加抗氧化蛋白的表達，從而協調抗氧化和抗炎反應。在基礎條件下，Nrf2被細胞骨架中的Keap1（一種E3泛素連接酶復合體的底物識別亞基）錨定在細胞質中，該復合體靶向Nrf2使其降解。當細胞暴露于氧化應激時，Nrf2從Keap1中釋放出來。Nrf2轉移到細胞核中，與ARE結合并誘導抗氧化蛋白和II相蛋白的表達，從而保護細胞免受氧化損傷。Nrf2和Keap1都是具吸引力的治療靶點。

Keap1:Nrf2抑制劑篩選檢測試劑盒旨在通過熒光偏振（FP）技術識別Keap1:Nrf2結合的抑制劑。熒光偏振是一種強大的工具，通過監測熒光標記分子與其結合伙伴結合時旋轉流動性的變化來研究分子間相互作用。為了確定抑制劑對Keap1:Nrf2復合物形成的影響，將Keap1蛋白和熒光標記的Nrf2肽在有或沒有測試抑制劑的情況下孵育30分鐘。使用能夠測量熒光偏振的孔板讀取器來測量Nrf2肽旋轉流動性的變化。

艾美捷BPS Bioscience-KEAP1-Nrf2抑制劑篩選檢測試劑盒:

貨號：72020

同義詞：Kelch樣ECH結合蛋白1、Nrf2的細胞質抑制劑、INRF2、Kelch樣蛋白19、KIAA0132、KLHL19

試劑盒格式：熒光偏振

適用物種：人

靶點：KEAP1

儲存/穩定性：

按照指示儲存時，該檢測試劑盒在收到之日起6個月內表現最佳。

應用：研究酶動力學。

篩選小分子抑制劑，用于藥物發現和高通量應用。

運輸溫度：-80℃

所需材料但未提供

可調節微量移液器及無菌吸頭

能夠進行熒光偏振測量的孔板讀取器，λex = 475-495 nm，λem = 518-538 nm

驗證數據：

圖：左側：Keap1與Nrf2的結合。右側：Nrf2抑制劑對Keap1:Nrf2結合的抑制作用。

使用Keap1:Nrf2抑制劑篩選檢測試劑盒（BPS Bioscience #72020）測量結合。Nrf2抑制劑KI696（Medchem Express #HY-101140）與Nrf2肽和Keap1在不同濃度下孵育。使用Bio-Tek熒光微孔板讀取器在λex 485nm、λem 530nm處測量熒光偏振。

文獻參考：

Inoyama, D., et al. 2012. J. Biomol. Screening 17(4): 435-447