PARP2,也稱為聚(ADP-核糖)聚合酶2或NAD? ADP-核糖基轉移酶2,是PARP家族的一部分。ADP核糖基化(即將ADP-核糖添加到蛋白質上)是一種可逆的蛋白質翻譯后修飾,主要涉及DNA損傷響應(DDR)途徑。聚ADP核糖基化(稱為PARylation)是添加線性或分支的ADP核糖鏈。PARP2參與DNA修復(只有10%的PARP活性歸因于PARP2),但也參與氧化應激和線粒體分裂。DDR和氧化應激途徑的功能失調可能導致腫瘤發生。PARP2的基因敲除表明其在脂肪生成、精子生成和胸腺細胞存活中的作用。PARP2也是核受體(如雌激素受體ER和過氧化物酶體增殖物激活受體PPAR)的輔助因子。PARP2在前列腺癌(PCa)中過表達,可能通過FOXA1(叉頭框蛋白A1)/AR途徑促進疾病發展。PARP抑制劑已在癌癥治療中取得成功,臨床上批準的抑制劑同時靶向PARP1和PARP2。進一步了解涉及PARP2的分子途徑及其對疾病的影響,將繼續為PARP2相關疾病的新療法鋪平道路。
PARP2比色法檢測試劑盒旨在用于檢測PARP2(聚(ADP-核糖)聚合酶2)活性,適用于篩選和分析應用。PARP2檢測試劑盒采用便捷的96孔板格式,包含100次酶反應所需的純化PARP2酶(氨基酸2-583)、反應底物和PARP檢測試劑緩沖液。組蛋白蛋白預先包被在96孔板上。接下來,將生物素化的NAD?混合液(稱為PARP底物混合液)與PARP2酶和活化的DNA模板在優化的檢測試劑緩沖液中孵育。然后,將鏈霉親和素-HRP處理該板,隨后加入比色法HRP底物,生成有色溶液。生成的信號與PARP2活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PARP2比色檢測試劑盒:
貨號:80581
同義詞:聚(ADP-核糖)聚合酶2、聚(ADP-核糖基)轉移酶2、ADPRT、PARP2、PARP-2
試劑盒格式:比色法
適用物種:人類
靶標:PARP2
儲存/穩定性:當按照說明儲存時,該檢測試劑盒在收到之日起6個月內可達到最佳性能。
應用:研究酶動力學,并用于藥物發現和高通量篩選(HTS)應用中的小分子抑制劑篩選。
運輸溫度:-80°C
所需材料(但試劑盒未提供)
1x PBS(磷酸鹽緩沖液)
PBST緩沖液(1x PBS,含0.05% Tween-20)
能夠在λ=450 nm處讀取吸光度的紫外/可見光分光光度計微孔板讀取器*
2 M硫酸(水溶液)
可調節微量移液器及無菌吸頭
軌道振蕩器
或者,也可以使用在650 nm處讀取的分光光度計,但檢測靈敏度將大大降低。
檢測結果示例:
圖:奧拉帕尼(Olaparib)和AZD-5305對PARP2活性的抑制作用
將PARP2與逐漸增加濃度的奧拉帕尼(Olaparib)和AZD-5305(編號#78318)共同孵育。使用Tecan紫外/可見光分光光度計微孔板讀取器測量吸光度。
文獻參考:
Brown, J.A., Marala, R.B. 2002. J. Pharmacol. Toxicol. Methods 47:137-41.
Gui B., et al., 2019 Proc Natl Acad Sci USA 116 (29): 14573-14582.
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