本期主題 什么是吸光值?
A260、A280和A230是紫外分光光度計在核酸濃度和純度檢測中常用的波長。通過這些波長的吸光值,可以計算出A260/A280和A260/A230比值,用于評估DNA或RNA的純度。在質粒DNA提取中,比值異常通常反映樣本被特定雜質污染。
下面先對質粒DNA濃度各數值代表的含義進行下詳細的介紹。
一、各吸光值含義
二、理想的比值范圍
對于更精確的定量,建議使用Qubit熒光定量或RiboGreen定量方法。
三、質粒DNA比值異常原因分析
因此,對于質粒DNA而言,吸光值超出正常范圍時,實際濃度便會有不準確性,建議若有電泳結果,需要將NanoDrop測定的比值結合瓊脂糖凝膠電泳的亮度一起判斷質粒質量。
四、濃度虛高或偏低
● 質粒構型(如超螺旋、線性、開環)不同,在瓊脂糖凝膠上的遷移速度不同,導致亮度與實際濃度不符。
● RNA殘留(未充分降解的小RNA片段)污染,殘留的RNA會在電泳上最下面看到有亮帶殘留,干擾對質粒濃度的判斷。
● 蛋白質或酚類物質污染,紫外分光光度計測得的A260值偏高,導致質粒濃度虛高。
● 斷裂的DNA片段,導致電泳亮度降低,但濃度測定仍顯示較高值。
五、索萊寶質粒提取試劑盒:
提取純化質粒DNA的得力助手,真實!
質粒是一種小型、環狀的DNA分子,存在于細菌等微生物中。它們獨立于細菌的染色體DNA存在,能夠自主復制,并且可以攜帶各種基因。它們是科學家們手中的“基因載體”,能夠幫助我們實現基因的轉移、表達和調控。在分子生物學實驗中,質粒提取是一項基礎且關鍵的操作。一個優質的質粒提取試劑盒,能夠幫助科研人員快速、高效地獲取高質量的質粒DNA。
主要的應用領域
基因克隆:獲取大量目標基因;基因庫構建;基因序列分析
基因表達:蛋白質生產;功能研究
遺傳工程:基因編輯;基因治療;轉基因生物
基因調控研究:啟動子分析;轉錄因子研究;信號通路研究
生物制藥:藥物開發;疫苗制備;基因治療藥物
教育和科研工具:教學實驗;科研工具
顯著優勢
操作簡便,省時高效,安全環保
流程標準化:無需有毒試劑,避免傳統方法中苯-酚、氯-仿等危險化學品的使用,只需離心即可完成。
快速提取:通常30-60分鐘即可獲得高純度質粒DNA,適合高通量實驗需求。
高純度、高得率
采用柱式純化技術,結合裂解和吸附配方,有效去除雜質(如RNA、蛋白質、基因組DNA)。
A260/A280=1.8-2.0,A260/A230=2.0-2.5,確保質粒提取的高濃度。
兼容性強,適用范圍廣
適用于多種大腸桿菌菌株,如DH5α等,對不同質粒均可輕松提取。
不同規模需求:從微量(1-5mL)到大量(100mL)培養物均可匹配。
下游應用廣:可直接用于PCR、酶切、轉化等高靈敏度實驗。
靈活選擇(不同級別試劑盒)
普通級:常規克隆、篩選
去內毒素級:細胞轉染、基因治療
索萊寶質粒提取試劑盒產品
貨號 | 名稱 |
D1100 | 質粒小量提取試劑盒 |
D1110 | 質粒大量提取試劑盒 |
D1120 | 革蘭氏陽性菌質粒小量提取試劑盒 |
D1130 | 革蘭氏陽性菌質粒大量提取試劑盒 |
D1140 | 去內毒素質粒小量提取試劑盒 |
D1150 | 去內毒素質粒大量提取試劑盒 |
D1160 | 酵母質粒小量提取試劑盒 |
DM1100 | 質粒小量提取試劑盒(磁珠法) |
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