培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。
培養基是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。
基礎調節原則:
調節時機--定容完成后、滅菌前調節pH,滅菌后需復核(高壓滅菌可能導致pH下降0.2–0.5)--所有培養基配制流程
調節劑選擇--1M-6M NaOH或HCl(高濃度減少體積誤差)--微生物/植物/動物細胞培養
目標范圍--
- 植物組培:pH5.6-6.0(常用5.8)
- 細菌培養:pH6.5-7.5(中性偏堿)
- 真菌培養:pH4.0-6.0(酸性)
操作細節:
分步調節法:
定量加入調節劑后充分攪拌,靜置1-2分鐘再檢測,避免局部過酸/堿;
少量多次添加(每次 ≤0.5ml),接近目標值時改用低濃度調節劑微調;
植物組培中,若初始pH>6.0,需用0.1M HCl回調至5.8±0.1。
緩沖系統應用:
對代謝產酸微生物(如乳酸菌),添加 磷酸鹽緩沖劑(pH6.4-7.2)或碳酸鹽緩沖劑;
動物細胞培養需CO?-碳酸氫鈉緩沖體系維持pH7.0-7.4。
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