圖 A：常規(guī) 316 不銹鋼柱表面為厚度約為 2 nm 的富 Cr 氧化物層；該金屬氧化物層的等電點（IEP）為 7，在酸性色譜條件下，部分活性位點與待測物發(fā)生金屬螯合作用，是非特異性吸附的根本原因。

Restek 敏銳地發(fā)現(xiàn)了這一問題，并推出了可以解決非特異性吸附的 Inert 惰性液相柱。Inert 惰性液相柱 采用化學氣相沉積（CVD）技術對柱管內(nèi)表面進行處理，即在柱管內(nèi)壁形成有機-無機雜化涂層，隔絕了待測物與金屬表面的相互作用，為色譜柱提供了良好的惰性。

圖 B：惰性液相色譜柱的內(nèi)壁經(jīng)過化學改性，其表面為有機-無機混合涂層（500 nm），從而防止了金屬與分析物之間的相互作用。

在本次的液相柱性能對比研究中，我們采用聯(lián)苯柱分析類固醇及其 II 相代謝物。聯(lián)苯與 C18 的選擇性有很大的不同， 由于苯環(huán)提供的 π-π 作用以及空間結構的識別能力，使得聯(lián)苯柱特別擅長分離芳香化合物及其同分異構體；與未經(jīng)惰性處理的常規(guī)液相柱相比，惰性柱提供了更好的峰形和更高的響應。

實驗結果證明，使用帶惰性涂層的液相柱可以減輕非特異吸附（NSA），不需要重復進樣或在流動相中添加可能降低系統(tǒng)靈敏度的試劑，就可以獲得穩(wěn)定的色譜性能。

 目標化合物：

下表展示了常規(guī)分析柱、常規(guī)保護柱、惰性分析柱、惰性保護柱在 4 種組合使用方式下，標準品（A）和從血漿（B）中提取的硫酸脫氫表雄酮（100 ng/mL）的半峰寬，對稱因子和峰高的比較，實驗證明，惰性保護柱與惰性分析柱的組合表現(xiàn)最好。

保護柱/分析柱，I 代表惰性，C 代表常規(guī)

聯(lián)苯固定相與待測物之間的 π-π 作用和空間結構識別能力，為異構體提供了良好的分離。使用經(jīng)優(yōu)化的色譜方法獲得的一些關鍵類固醇（異構體）的 MRM 圖如下：

看完關于惰性聯(lián)苯柱在生物相關代謝物分析中的應用后，您實際工作中的問題是否得到了解答呢？如您有任何疑問，歡迎撥_打 4000 815 005 熱線聯(lián)系 Restek 技術團隊。同時您還可申請產(chǎn)品試用，優(yōu)異性能，即刻體驗！