黃曲霉，半知菌類，一種常見腐生真菌。多見于發(fā)霉的糧食、糧制品及其它霉腐的有機物上。菌落生長較快，結(jié)構(gòu)疏松，表面灰綠色，背面無色或略呈褐色。菌體有許多復(fù)雜的分枝菌絲構(gòu)成。營養(yǎng)菌絲具有分隔；氣生菌絲的一部分形成長而粗糙的分生孢子梗，頂端產(chǎn)生燒瓶形或近球形頂囊，表面產(chǎn)生許多小梗（一般為雙層），小梗上著生成串的表面粗糙的球形分生孢子。分生孢子梗、頂囊、小梗和分生孢子合成孢子頭，可用于產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是釀造工業(yè)中的常見菌種。

一、檢驗檢疫要求

1995年，世界衛(wèi)生組織制定的食品允許濃度為15ug/kg。

美國聯(lián)邦政府有關(guān)法律規(guī)定人類消費食品和奶牛飼料中的黃曲霉毒含量（指b1+b2+g1+g2的總量）不能超過15ug/kg.人類消費的牛奶中的含量不能超過0.5ug/kg,其他動物飼料中的含量不能300ug/kg。

而歐盟國家規(guī)定更加嚴格，要求人類生活消費品中的b1的含量不能超過0.05ug/kg。

二、檢驗檢疫方法

1、薄層層析

薄層層析（thin-layer chromatography,tlc)是在研究方面應(yīng)用的分離技術(shù).自1990年，它被列為aoac (association of official agricultural chemists)標準方法，該方法同時具有定性和定量分析的功能。

2、液相色譜

液相色譜（liquid chromatography,lc)與薄層層析在許多方面具有相似性，二者互相補充.通常用tlc進行前期的條件設(shè)定，選擇適宜的分離條件后，再用lc進行的定量測定。

3、免疫化學(xué)分析

利用具有高度專一性的單克隆抗體或多克隆抗體設(shè)計的的免疫分析方法，也是的檢測方法.這類方法通常包括放射免疫分析方法（radioimmunoassay,ria),酶聯(lián)免疫法（enzyme-linked of immunosorbent assay,elisa)和免疫層析法（immunoaflinity column assay,ica).它們均可以對進行定量測定。

(1)免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術(shù)-hplc法

免疫親和柱法和酶聯(lián)免疫吸附法雖然都可達到速簡便效果，但酶聯(lián)免疫吸附法僅能檢測單一毒素（如b1)含量，而且易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，難以控制.免疫親和柱法（包括熒光光度法和hplc法）卻能達到既定量準確又快速簡便的要求。

免疫親和柱的使用可以避免傳統(tǒng)tlc和hplc的缺點，同時免疫親和柱與tlc和hplc法結(jié)合可以大大提高工作效率，提高靈敏度和準確度。

免疫親和柱-熒光光度計法是以單克隆免疫親和柱為分離手段，用熒光計，紫外燈作為檢測工具的快速分析方法.它克服了tlc和hplc法在操作過程中使用劇毒的真菌毒素作為標定標準物和在樣品預(yù)處理過程中使用多種有毒，異味的有機溶劑，毒害操作人員和污染環(huán)境的缺點.同時免疫親和柱-熒光光度計法分析速度快，一個樣品只需10-15min,比傳統(tǒng)方法快幾個小時甚至幾天時間；儀器設(shè)備輕便容易攜帶，自動化程度高，操作簡單，直接讀出測試結(jié)果，可以在小型實驗或現(xiàn)場使用.可以進行總量 (b1b2g1g2) 的測定，檢測限可達到1ug/kg,達到標準值以下測定范圍為1-300ug/kg。

免疫親和柱-高效液相色譜法比傳統(tǒng)的hplc法更加安全，可靠，靈敏度和準確度高.它采用單克隆抗體免疫技術(shù)，可以性地將或其他真菌毒素分離出來，分離效率和回收率高。

分析原理試樣中的用一定比例的甲醇/水提取液經(jīng)過過濾，稀釋后，用免疫親和柱凈化，以甲醇將親和柱上的淋洗下來，在淋洗液中加入溴溶液衍生，以提高測定靈敏度，然后用熒光分光光度計進行定量.也可以將甲醇-淋洗液的一部分注入hplc中，對b1,b2,g1,b2分別進行定量分析.免疫親和柱是用大劑量的單克隆抗體固化在水不溶性的載體上，然后裝柱而成.該方法的測定范圍0-300ug/kg。

(2)酶聯(lián)免疫吸附法

1996年，nakane 建立了辣根過氧化物酶標記抗體的測定技術(shù).由于該方法簡便，敏感，特異，可作為多種抗原或抗體的測定，20世紀70年代后期，該方法引入真菌毒素的檢測中，下面介紹的是競爭性酶聯(lián)免疫吸附間接法檢測b1。

原理：將已知抗原吸附在固態(tài)載體表面，洗除末吸附抗原，加入一定量抗體與待測樣品（含有抗原）提取液的混合液，競爭培養(yǎng)后，在固相載體表面形成抗原抗體復(fù)合物.洗除多余抗體成分，然后加入酶標記的抗球蛋白的第二抗體結(jié)合物，與吸附在固體表面的抗原抗體結(jié)合物相結(jié)合，再加入酶底物.在酶的催化作用下，底物發(fā)生降解反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì)，通過酶標檢測儀測出酶底物的降解量，從而推知被測樣品中的抗原量。

(3)微柱篩選法

可以用來半定量測定各種食品中b1,b2,g1,g2的總量。

原理：樣品提取液中的被微柱管風(fēng)硅鎂型吸附層吸附后，在波長365nm紫外光燈下顯示藍紫色熒光環(huán)，其熒光強度與在一定的光密度范圍內(nèi)成正比例關(guān)系.若硅鎂型吸附劑層未出現(xiàn)藍紫色熒光，則樣品為陰性（方法靈敏度為5-10ug/kg).由于在微柱上不能分離b1,b2,g1,g2,所以測得結(jié)果為總的含量。

(4)一步式檢測金標試紙法

一步式檢測金標試紙法是利用單克隆抗體而設(shè)計的固相免疫分析法.由此產(chǎn)生的一步式快速檢測試紙可在5—10分鐘完成對樣品中的定性測定.借助標準樣品，這種方法能估算的含量，非常適用于現(xiàn)場測試和進行大量樣品的初選。

三、檢測方法分析

薄膜層析法和液相色譜法是目前國內(nèi)絕大多數(shù)檢測機構(gòu)都在使用的方法，由于其檢測周期長，程序復(fù)雜，所需試劑繁多等缺點已遠遠不能滿足現(xiàn)代檢測要求.隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是免疫學(xué)，生物化學(xué)，分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，人們已創(chuàng)建了不少快速，簡便，特異，敏感，低耗且適用的檢測方法.而且以金標試紙為代表的這些方法已經(jīng)被國家所廣泛使用，引進和消化這些的方法是我們檢測領(lǐng)域的當務(wù)之急.免疫親和柱法優(yōu)點很多，但由于檢測費用過高，而無法普及.而一步式檢測金標試紙法似乎更適用于中國，值得推廣。

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