蛋白酶K/Proteinase K
蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質的一般降解。從林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中純化得到。蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力。
產品:蛋白酶K
含量:≥20mg/ml 【24mg/ml】
純度:≥95% SDS-PAGE
活性:≥30U/mg 【42U/mg】
DNase:未檢出
RNase:未檢出
CAS號:39450-01-6
類型:非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶
分子量:28,900道爾頓(28.9kDa)
物理和化學性質
溶液顏色:無色透明,如出現沉淀則不能再使用
穩定性:在尿素和SDS中穩定,EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活
活性范圍:在較廣的pH范圍(4~12.5)內及高溫(50~70°C)均有活性
作用與功能
DNA提取:蛋白酶K在DNA提取中的主要作用是酶解與核酸結合的組蛋白,使DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進行抽提,除去雜質,收集DNA。
RNA提取:在RNA提取過程中,蛋白酶K可以抑制RNA酶的活性,降低RNA酶對RNA的降解作用。
原位雜交技術:用于雜交前的處理,具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交信號。但需注意濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,會對細胞結構造成破壞。
病毒滅活:蛋白酶K因其蛋白水解能力可以破壞病毒表面的蛋白,具有作為病毒滅活消毒劑的潛力。
工業應用:在皮革、毛皮、絲綢、醫藥、食品、釀造等方面有廣泛應用,如皮革工業的脫毛和軟化、蠶絲脫膠、肉類嫩化等。
應用注意事項
在使用蛋白酶K時,應注意控制其濃度和處理時間,以避免對細胞結構造成不必要的破壞。
蛋白酶K具有自我酶解特性,在無保護劑時很難長期穩定保存,因此在制備和儲存過程中需要特別注意。
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